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皆様ありがとうございます。 削除/引用 No.326-7 - 2012/03/23 (金) 19:06:09 - E.+J.+coli 種々考察していただきまして、ありがとうございます。 やはり難しい現象ですよね。 ただ、IPTG添加、無添加に関しての結果の再現だけは何故かとれております。 ＞IPTGと結合して可溶フォーム 個人的にこういう考察は好きです。

(無題) 削除/引用 No.326-6 - 2012/03/23 (金) 11:21:48 - ささ IPTG入れても発現量あんまり増えてないのかぁ。IPTGと結合して可溶フォームになるとか...。ないですね、すいません、適当です。

(無題) 削除/引用 No.326-5 - 2012/03/23 (金) 10:00:01 - う たまたまじゃないですかね・・・。 もともと、どうして不可溶になるのか、 原理の説明は難しいものですから。 細胞内では可溶なはずなのに大腸菌では不可溶になったりとか。 温度やその他の条件をコントロールできるものは すべてコントロールしたのに、 可溶なものと不可溶なものの割合が違ったりしたこと 結構、経験しています。 また、経験的には 不可溶なものがあって可溶なものもある場合、 色々作業をしていると（精製とかの間に）、 結局は不可溶になることもありました。 もともと、そのタンパク質は 大腸菌内では不可溶になる傾向が高い、 のではないかと個人的に思います。

補足です。 削除/引用 No.326-4 - 2012/03/22 (木) 19:14:39 - E.+J.+coli すみません。補足させてください。 温度と時間は、ほぼ同じ条件下で行なっております。 一方は37℃培養、もう一方は37℃培養でOD600が0.4付近の時にIPTGを添加ております。 発現量に関しましては、SDS-PAGEの見た目の感覚になってしまいますが、ほぼ同じぐらい、不要性画分に発現しているという印象です。

(無題) 削除/引用 No.326-3 - 2012/03/22 (木) 15:30:18 - co 9:1で不溶性画分にあったタンパク（ただし、この1は検出限界以下）だったものがIPTG添加後、90:10で不溶性画分にあるんだけど10だから検出できた？？

(無題) 削除/引用 No.326-2 - 2012/03/22 (木) 14:32:49 - ~ 発現量や培養条件等の条件の違いにより、可溶性となったタンパク質が少し得られた。 温度や時間等について厳密にはコントロールできていませんよね？

不溶画分から可溶画分へ 削除/引用 No.326-1 - 2012/03/22 (木) 13:31:26 - E. J. coli IPTG誘導した結果、これまで不溶画分にのみ得られていたタンパク質が、一部可溶画分に得られるようになりました。 これはどのように解釈したらよろしいでしょうか？

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