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(無題) 削除/引用 No.3345-5 - 2014/09/04 (木) 17:30:37 - 抗原太郎 なるほど。 組織様有難うございます。 大変参考になりました。

(無題) 削除/引用 No.3345-4 - 2014/09/04 (木) 17:07:34 - 組織 パラフィンブロックの作製過程（processing）では、有機溶媒に長時間漬けたり、60度程度の高温に加熱するため、分子によって差はあれ、かなり抗原性が落ちます。

(無題) 削除/引用 No.3345-3 - 2014/09/04 (木) 16:44:05 - 抗原太郎 組織さま 早速のご回答有難うございます。 4%PFA固定の段階では抗原がマスキングされることはあまりなく、その後のパラフィン包埋のときにマスキングされるため、という理解でよろしいでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.3345-2 - 2014/09/04 (木) 16:12:46 - 組織 賦活化（retrieval）の言葉通り、目的はパラフィンブロック作製過程で生じる抗原のロスを取り戻す（補う）ため、加熱処理や酵素処理によって抗原を露出したり、抗体の浸透性を上げる操作です。よって、抗原性が良く保持されている凍結切片では基本的に不要です。 例外的に、ある種の核抗原では、凍結切片でも加熱処理が必要になることがあります。

抗原賦活化について 削除/引用 No.3345-1 - 2014/09/04 (木) 16:05:14 - 抗原太郎 4% PFAで灌流固定した組織をOTCコンパウンドに包埋し、クリオスタットで切片を作製するいわゆる凍結切片の場合、抗原の賦活化は行わないことが多いと思います。 一方で、同様に4% PFA灌流固定してパラフィン包埋したサンプルから作成した切片は抗原の賦活化を行うことが一般的であると思います。 ホルマリン固定や、PFA固定の部分は同じであるのに、なぜ包埋する方法によって賦活化が行われたり行われなかったりするのでしょうか。 賦活化の原理によると固定で起きたメチレン架橋を緩めるなどが書かれていますが、ならばPFA固定⇒凍結切片サンプルでも賦活化が必要ではないかと思ってしまいます。 もちろん、抗原によって個別の対応をする必要はあろうかと思いますが、一般論として理由を知っている方がいましたらご回答お願いします。

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