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caspase3について トピック削除
No.3378-TOPIC - 2014/09/14 (日) 13:51:09 - トムヤムクン
現在、大学の卒業論文作成のために細胞死、特にアポトーシスを評価する実験を行っております。
in vitro で細胞に刺激を加え、ウェスタンブロット法でタンパクレベルで解析を行なっています。
刺激を加えることにより、切断され活性化しているcaspase3のタンパクの発現は確認できました。
しかし、刺激の種類により活性化され切断されたcaspase3が二本発現する場合(19,17kDa)と一本だけ(17kDa)だけの場合がありました。これはどのように解釈すれば良いのでしょうか。
また、細胞死について勉強していくうちに一つ疑問に思ったのですが、ネクローシスではcaspase3は活性化しないのでしょうか?

まだ研究を始めて半年足らずで、知識不足でお恥ずかしいのですが、何卒御教授よろしくお願い致します。
また、参考になるような文献も合わせて教えていただけると助かります。
 
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(無題) 削除/引用
No.3378-2 - 2014/09/15 (月) 06:45:14 - おお
もしこれについてpublicationがないなら大変おもしろいこととおもいます。論文一報つきつめればかけるのではというきがします。逆にいうともしかしたら他人にいいねたを供給しているということにならないかという危惧も、、、ただしわたしはながらくcaspaseはフォローしてませんので本当にこのことについて研究がなされてないかくわしくありません。そう言う意味では詳しい方のめにとまればいいのですが、、、

はっきりとした事はいえませんがcasp3活性化できるのはcasp9, 8, 10と言われてますが、それぞれの特異性の違いで切れ方が変わる可能性がないかとか少し調べてみてはどうでしょうか。mitochondriaなら9からの寄与が大きいでしょうし、TNF関係なら8, 10から直接の経路もあるかもしれません。

ネクローシスについても詳しくフォローしていませんが実験的にはcaspaseの活性化をブロックしてネクローシスを起こす実験系が樹立されています。生理的な条件ではcaspaseが活性化しないのかもしれませんし、活性化しても細胞死のシグナルが出ないのかもしれません。ただ、だいたいcaspase3の活性化で判断できることが多いのではないかとかってな想像はしています。また100%ネクローシス、アポトーシスという典型的な場合ばかりでないので、caspase3が活性化していても、形態的には完全なアポトーシスでないこともあるようです。

caspase3について 削除/引用
No.3378-1 - 2014/09/14 (日) 13:51:09 - トムヤムクン
現在、大学の卒業論文作成のために細胞死、特にアポトーシスを評価する実験を行っております。
in vitro で細胞に刺激を加え、ウェスタンブロット法でタンパクレベルで解析を行なっています。
刺激を加えることにより、切断され活性化しているcaspase3のタンパクの発現は確認できました。
しかし、刺激の種類により活性化され切断されたcaspase3が二本発現する場合(19,17kDa)と一本だけ(17kDa)だけの場合がありました。これはどのように解釈すれば良いのでしょうか。
また、細胞死について勉強していくうちに一つ疑問に思ったのですが、ネクローシスではcaspase3は活性化しないのでしょうか?

まだ研究を始めて半年足らずで、知識不足でお恥ずかしいのですが、何卒御教授よろしくお願い致します。
また、参考になるような文献も合わせて教えていただけると助かります。

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