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ありがとうございます。 削除/引用 No.3390-4 - 2014/09/23 (火) 18:12:41 - あき アドバイスありがとうございます。試にまず一度してみます。

(無題) 削除/引用 No.3390-3 - 2014/09/20 (土) 07:34:29 - おお 経験はないですが、そのAに対する抗体をビーズ(支持体)にコバレントにくっつけてしまえば、血清中の抗体があっても影響をうけにくいですよね。 直接支持体につける方法と、protein AやGにクロスリンクしてしまう方法があります。 場合によってはそうやって作ったビーズはAをトラップしたごに、Aをreleaseして再生して何回か使える可能性はあります。なので1回の処理でまだ残っているなら再生してもう一度除去をするのも手だと思います。 WBは未処理血清で検出できるなら、A除去操作後でも同じ操作で検出できると思いますが。

(無題) 削除/引用 No.3390-2 - 2014/09/20 (土) 03:44:51 - fちゅ イオン交換を前に挟んでみては。

血清からの特定タンパクの除去方法 削除/引用 No.3390-1 - 2014/09/20 (土) 02:26:28 - あき こんにちは。 現在ヒト血清から、あるタンパク（以下タンパクAとします）をウサギ由来A特異抗体＋Protein Gで除去したのちに、その血清を培養細胞の実験に使いたいと考えています。培養細胞のLysateと違い、ヒト血清には多数のIgG分画が含まれていますので、前もってProteinGで非特異的IgGを除去した後で、ウサギ由来A特異抗体＋Protein Gを加えてみようと思っているのですが、そのあたりのご経験をお持ちの方がいらっしゃいましたら、方法とコツを教えていただけないでしょうか（できれば、タンパクAが除去されたこともWBで確認したいです）？色々やってみればよいのですが、血清入手が困難な状況でして、なるべく血清の無駄なく実験をしたいと考えています。もしわかれば、例えば血清100ulにProteinGをどの程度加えればよいか？3回ほど（ウサギ由来A特異抗体＋Protein G）を反応させた方が良い、などなど色々教えていただければ幸いです。よろしくお願いします。

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