Bio Technical フォーラム

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培地の非働化時間 トピック削除
No.3460-TOPIC - 2014/10/15 (水) 13:31:04 - あ
質問なのですが
通常30分間の非働化処理を5時間してしまいました。

5時間してしまうと中の成分が変わっていたりして継代には使えないでしょうか?
よければご回答お願いいたします。
 
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No.3460-5 - 2014/10/15 (水) 16:51:49 - 独り言
30分に比べたら、ある程度影響はあるかもしれませんが、明らかに死細胞が増えるほどでもないと思う。もしくはコンフルになったころに栄養がなくなるのが早いかもしれないけど、細胞が増えればいいだけの用途であれば使えると思います。

(無題) 削除/引用
No.3460-4 - 2014/10/15 (水) 16:12:32 - おお
まあそれでも細胞は増えるような気がしますが、なにがしか不都合がありそうとご自身も考えているように、あまり薦めれるものではありません。新たに非どうかした血清に2割り程度まぜるとか、てかそれも薦めていいものかという感じはします。細胞凍結保存用につかうとか、なにか細胞を増やしたりする以外で使った方がよさそうです。

(無題) 削除/引用
No.3460-3 - 2014/10/15 (水) 14:19:37 - mon
培地ではなく、血清ですよね。
最近は業者の血清調製の技術も上がり、生化学的アッセイも行われているものも多いので、非働化を行わないことも多いのですが。
非働化は熱処理なのでいろいろな影響が出てくることが予想されますが、扱っている細胞次第です。
「おそらく」培養が楽な癌細胞株だと増殖そのものには問題ないと思います。これは試してみないとわかりません。
また、細胞をいろいろな物で刺激した際の応答は変わる可能性があります。正解はありません。
予備の血清があるなら本実験はそちらを使い、凍結保存用培地とか、ただ細胞を増やせば良い時に「長く非働化した血清」を使うとかが現実的な対応かな。

(無題) 削除/引用
No.3460-2 - 2014/10/15 (水) 14:15:11 - ~
長時間の非動化を行ってしまった血清を使っても培養できたという話は聞きますので、捨てずに継代に使ってみる価値はあると思います。

確認するのであれば適切に非動化された血清と並べて評価することになるでしょうから、その手間と時間がもったいないというのであれば、今の時点で捨てる判断をするのも手ですが。

培地の非働化時間 削除/引用
No.3460-1 - 2014/10/15 (水) 13:31:04 - あ
質問なのですが
通常30分間の非働化処理を5時間してしまいました。

5時間してしまうと中の成分が変わっていたりして継代には使えないでしょうか?
よければご回答お願いいたします。

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