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Tris-HCLの作製法 トピック削除
No.3512-TOPIC - 2014/11/05 (水) 16:36:31 - Tris
お世話になっております。

ウェスタンブロットのゲルを作製するため、0.5MTris-HCL pH6.8と1.5MTris-HCL pH8.8を調整しております。

初歩的な質問なのですが、1.5MTris-HCL pH8.8の場合、Trisが完全に溶解せず、pH調整のためHCLを加えると溶け始めます。
しかし、完全には溶解せず、少し粉末が残っている状態で、pH8.8になります。

完全には溶解せず、少し粉末が残っている状態は普通なのか、ゲル作製のために1.5MTris-HCL pH8.8を作られている方も多いと思います。

ご教授いただけましたら、幸いです。
よろしくお願い致します。
 
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No.3512-9 - 2014/11/05 (水) 23:20:45 - 独り言
1.5MTrisだとすぐには溶けないけど、2−3時間回していたら溶ける。

溶けていない状態でpH電極いれるのは危険でしょう。それともpH試験紙でがんばっているのかな。

(無題) 削除/引用
No.3512-8 - 2014/11/05 (水) 23:19:23 - おお
ちなみにわたしは3M TRIS-HCL (pH 8.8)のストックをつくることがあります。3MだとpHをあわせていくと溶けていくような感触はありますが、1.5Mでは余裕です。
なので何か違うんではないかと、、、

(無題) 削除/引用
No.3512-7 - 2014/11/05 (水) 19:58:09 - TS
1〜2年前くらいのSigmaのTris(Trizma base)で、不良品が出まわっていました。
色がおかしいし(少し薄茶色い)、溶けにくいので文句を言ったら、
こっそり回収しているようなことを言って、交換してもらいました。

それとは違うかもしれませんが、溶けないのはなんかおかしくなっているのでしょう。

(無題) 削除/引用
No.3512-6 - 2014/11/05 (水) 19:54:34 - qw
「完全には溶解せず、少し粉末が残っている状態」と言っておられますが、トリスを溶かそうとした時、粉末という質感はないだろうと思います。むしろ、溶けきらない食塩や硫安の質感ではないかなあ。
HEPESやMESなんかだと、粉末が溶けないという質感があります。Bis-trisだったりしないといいですね。

(無題) 削除/引用
No.3512-5 - 2014/11/05 (水) 19:15:04 - ~
塩の形が違うものと勘違いして、1.5Mにしたつもりがもっと濃いものを作ってしまった?

まずは使った試薬瓶に書かれている分子量を確認して見ては?

(無題) 削除/引用
No.3512-4 - 2014/11/05 (水) 19:03:23 - AP
Trisの溶解度は25℃で100 mLの水に50 gくらいだそうだ。
1.5 Mを100 mLつくるとして必要なTrisは18 gくらい。
Trisの体積があるので水100 mLは入れられないとしても、半分の50 mLでも余裕のはずだべさ。

試薬がおかしくないか?グレードとか保管状態(ゴミや他の試薬のコンタミ)とか、あるいはラベル読み違い

(無題) 削除/引用
No.3512-3 - 2014/11/05 (水) 17:57:35 - み
3Mでも溶けますよ。
HClを入れる前の水の量が少ないだけじゃないですか?
少し電子レンジなどで温めて溶かした後、冷ましてpH調整するなど工夫されては?

(無題) 削除/引用
No.3512-2 - 2014/11/05 (水) 16:51:49 - az
何に溶かしてるんですか?
スターラーなどで撹拌すれば溶けると思いますが。
HClを入れて溶けるのはおかしいと思います。

Tris-HCLの作製法 削除/引用
No.3512-1 - 2014/11/05 (水) 16:36:31 - Tris
お世話になっております。

ウェスタンブロットのゲルを作製するため、0.5MTris-HCL pH6.8と1.5MTris-HCL pH8.8を調整しております。

初歩的な質問なのですが、1.5MTris-HCL pH8.8の場合、Trisが完全に溶解せず、pH調整のためHCLを加えると溶け始めます。
しかし、完全には溶解せず、少し粉末が残っている状態で、pH8.8になります。

完全には溶解せず、少し粉末が残っている状態は普通なのか、ゲル作製のために1.5MTris-HCL pH8.8を作られている方も多いと思います。

ご教授いただけましたら、幸いです。
よろしくお願い致します。

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