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96穴プレートでの培養・培地交換 トピック削除
No.356-TOPIC - 2012/04/02 (月) 16:39:36 - 96
現在、浮遊細胞にプラスミドをトランスフェクションし、96穴プレート(平底)にまいた後、G418でセレクションしてます。
今1週間目ですが、細胞の増殖が遅く、出てきたコロニーもまだ小さいため、あと1週間ほど待とうと考えています。

お伺いしたのですが、細胞によりけりかもしれませんが、96穴プレートでのセレクションの際、2週間培地交換なしで細胞を培養された方おられますでしょうか?
細胞の生育の関係上、培地交換によりコロニー状のものがバラバラになることを避けたいと考え、このような質問をいたしております。

経験がある方のご意見よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.356-3 - 2012/04/03 (火) 08:49:33 - 96
ema様

アドバイスありがとうございます。

>>100ul(もっとこわければ50ul)を取って壁面を伝わせて底を乱さないように同量追加してみてください。

コロニーが生えていないウエルで一度試してみて、問題なければこの方法を使用させていただきます。

ありがとうございました。

もう少しも待ってもいいけど 削除/引用
No.356-2 - 2012/04/03 (火) 07:47:27 - ema
もう少し待っても大丈夫だと思いますが、あえて培地交換をするなら96穴なら200ulの液量だと思いますので100ul(もっとこわければ50ul)を取って壁面を伝わせて底を乱さないように同量追加してみてください。

96穴プレートでの培養・培地交換 削除/引用
No.356-1 - 2012/04/02 (月) 16:39:36 - 96
現在、浮遊細胞にプラスミドをトランスフェクションし、96穴プレート(平底)にまいた後、G418でセレクションしてます。
今1週間目ですが、細胞の増殖が遅く、出てきたコロニーもまだ小さいため、あと1週間ほど待とうと考えています。

お伺いしたのですが、細胞によりけりかもしれませんが、96穴プレートでのセレクションの際、2週間培地交換なしで細胞を培養された方おられますでしょうか?
細胞の生育の関係上、培地交換によりコロニー状のものがバラバラになることを避けたいと考え、このような質問をいたしております。

経験がある方のご意見よろしくお願いします。

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