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マウス成体脳のcell dissociation トピック削除
No.3629-TOPIC - 2014/12/04 (木) 13:30:48 - シジュルカ
いつも参考にさせて頂いております。
今回マウス成体脳(大脳皮質)からcell suspensionを作製したく投稿させていただきました。

これまでに成体マウスの大脳皮質(2mm角)をハサミで細断し、トリプシンやパパイン処理によるcell suspendを試みましたがうまくいきません。具体的には遠心(1,000rpm, 5min)後も上清に濁ったものが残存しており収率が悪いこと(これが細胞なのかdebrisなのかは不明)などがあります。

成体脳を用いてcell dissociationを行った経験がないのですが、一般的な方法や論文等があればご教授いただけないでしょうか。実験目的はその後の細胞をFACSや培養したいと考えております。

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3629-2 - 2014/12/04 (木) 13:57:06 - サンショウウオ
サンプルを少しとってディッシュかスライドガラス上に垂らせば残存物が細胞かデブリのどちらか判断がつくと思います。

マウス成体脳のcell dissociation 削除/引用
No.3629-1 - 2014/12/04 (木) 13:30:48 - シジュルカ
いつも参考にさせて頂いております。
今回マウス成体脳(大脳皮質)からcell suspensionを作製したく投稿させていただきました。

これまでに成体マウスの大脳皮質(2mm角)をハサミで細断し、トリプシンやパパイン処理によるcell suspendを試みましたがうまくいきません。具体的には遠心(1,000rpm, 5min)後も上清に濁ったものが残存しており収率が悪いこと(これが細胞なのかdebrisなのかは不明)などがあります。

成体脳を用いてcell dissociationを行った経験がないのですが、一般的な方法や論文等があればご教授いただけないでしょうか。実験目的はその後の細胞をFACSや培養したいと考えております。

よろしくお願いします。

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