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細胞膜の染色 トピック削除
No.3705-TOPIC - 2015/01/06 (火) 19:05:43 - Cell
細胞の高さを調べるために細胞膜を抗体で標識しようと思っています。
ヒトの表皮細胞を用いています。

細胞膜全体を標識するのに適した抗体は何がいいのでしょうか?
お勧めの抗体がありましたら教えてください。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.3705-6 - 2015/01/07 (水) 13:33:21 - Cell
ではKITの方で考えてみたいと思います。

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.3705-5 - 2015/01/07 (水) 12:33:45 - pp
私もDiOやDiIを勧めますね。
他にも、細胞膜標識試薬として蛍光標識レクチンなどもあるようですが、抗体を使っている論文は見た事はないです。

どうしても抗体でやりたいということであれば、その細胞で強発現している細胞表面タンパク質の抗体を使えばよいわけで、その辺の情報はご本人がお持ちでしょう。
もしくは、こんな情報もあります。
http://www.abcam.com/primary-antibodies/plasma-membrane-marker-antibodies

抗体を用いる場合に注意しないといけないのは、細胞が極性を持っている場合に局在が変化する可能性があることでしょうか。
あと、DiOやDiIは固定した細胞の染色には不向きなので、染色してから固定する必要があるようです。

(無題) 削除/引用
No.3705-4 - 2015/01/07 (水) 12:12:03 - AP
そういう消極的な理由ですか。
色素で染めるのなんて、「新しい手法を取り入れる」というほど大げさなこっちゃないでしょう(kitなんてもんでもないのは理解してる?)。体染色のほうがよっぽど面倒でトラブルにあいやすいのに。。
いい標的分子を教えてもらっても、入手した抗体によって出来不出来があったりするし。

質問そのものに関しては、他の方にお任せしますわ。

(無題) 削除/引用
No.3705-3 - 2015/01/07 (水) 11:53:07 - Cell
あまり時間もなく新しい手法を取り入れたくないとの思いからです。
抗体染色はよく行ってきたのでその路線で行きたいと考えています。

細胞膜をラベルできるKITがあることも便利なのも理解していますができれば抗体染色で行いたいです。

(無題) 削除/引用
No.3705-2 - 2015/01/06 (火) 20:47:06 - AP
抗体染色決め打ちなのは訳があるんでしょうか。
そうじゃなくて、ただ単に思考が硬直しているだけだったら、細胞膜を選択的に染める蛍光色素は色々ありますが。DiIとか、

細胞膜の染色 削除/引用
No.3705-1 - 2015/01/06 (火) 19:05:43 - Cell
細胞の高さを調べるために細胞膜を抗体で標識しようと思っています。
ヒトの表皮細胞を用いています。

細胞膜全体を標識するのに適した抗体は何がいいのでしょうか?
お勧めの抗体がありましたら教えてください。

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