全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.3919-6 - 2015/03/05 (木) 11:26:15 - mon GuHClベースのものも報告されていますね。使ったことはないけど。 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2679975/pdf/nihms103729.pdf

(無題) 削除/引用 No.3919-5 - 2015/03/05 (木) 11:11:56 - 七誌 皆様回答ありがとうございます。充分なバッファーを使ってしんとうナシで行ってみようと思います。またマイルドな条件でのバッファーについてのご意見を下さった方もありがとうございます。比較的はがしやすいときはそちらも使ってみて最適な方法をこれから模索していようと思います。

(無題) 削除/引用 No.3919-4 - 2015/03/05 (木) 10:45:58 - ac 2-MEをあまり使いたくないので、酸性バッファーを主に使っています。 比較的マイルドな条件なので、結合が強い抗体や量が多いタンパク質を検出した後だと残ることもありますが、概ね結果は良好です。 インキュベーションも室温でできますし、2-MEの揮発がないので健康面でも安心かと。 いろいろレシピがありますが、だいたいはGlycine-HCl（pH 2.0-3.0）にSDSを入れたり、Tewwn-20を入れたりしていますね。 調べてみると見つかりますよ。

(無題) 削除/引用 No.3919-3 - 2015/03/05 (木) 10:32:09 - AP むしろ、浸透は必須ではないとおもいます。 タッパーなどに容器にメンブレンと十分量の溶媒を入れ、ウォーターバスかオーブンで加熱すればいいと思います。心配なら時々手で揺すって。

(無題) 削除/引用 No.3919-2 - 2015/03/05 (木) 10:29:47 - TK-1 PierceのStripping bufferなら室温で問題なし。Shakerを買うより安いです。

SDS-PAGEのストリッピングについて 削除/引用 No.3919-1 - 2015/03/05 (木) 09:53:09 - 七誌 SDS-PAGEにおいて一つのメンブレンから複数の抗体を用い検出を考えています。はがし液にはSDS, 2-mercaptoethanol, 62.5 mM Tris-HClからなるストリッピングバッファーを使用し、定法にならって50-60℃で30分の条件にしようと思っています。しかし、自分の研究室には加温型シーソーシェーカーがありません。買えば済む話かも知れませんが極力お金は節約したいところですただの。シェーカーをインキュベータの中に入れるのも温度にムラができそうですし、事前に加温したバッファーに浸して室温でしんとうさせるだけでも充分なはがしの効果が期待できるでしょうか？（抗体によってはがれ方が異なり絶対にというのは難しいと思いますが）。私のところは加温型のは無いけどこうしているなどのお話があればぜひお聞かせください。

全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---