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無細胞タンパク発現系のエンドトキシンについて トピック削除
No.4052-TOPIC - 2015/04/24 (金) 17:50:38 - saba
初めまして、タンパク発現の実験をしていて疑問に思ったことがあるので質問させてください。

大腸菌を用いたタンパク発現ではエンドトキシンの産生が考えられます。
無細胞タンパク発現系を用いた場合、エンドトキシンの産生は考えられるのでしょうか?

私的には大腸菌を用いていないので、エンドトキシンが産生されることはないと思っています。なので、タンパク発現後にエンドトキシン測定をせずに使用しても良いのでは、と考えています。

作成したタンパク質は細胞に添加する予定です。

宜しければご回答よろしくお願い致します。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.4052-4 - 2015/04/27 (月) 12:31:38 - saba
おお様、mon様

早速の回答ありがとうございます。

エンドトキシンの産生はないということなので、混入に気を付けて実験を進めていきたいと思います。
とても助かりました。ありがとうございました!

(無題) 削除/引用
No.4052-3 - 2015/04/25 (土) 00:19:29 - おお
>[Re:1] sabaさんは書きました :
> 初めまして、タンパク発現の実験をしていて疑問に思ったことがあるので質問させてください。
>
> 大腸菌を用いたタンパク発現ではエンドトキシンの産生が考えられます。
> 無細胞タンパク発現系を用いた場合、エンドトキシンの産生は考えられるのでしょうか?

大腸菌のlysateを利用した蛋白合成系では産生はされないですが、混入はあるでしょう。

(無題) 削除/引用
No.4052-2 - 2015/04/24 (金) 18:37:58 - mon
大腸菌を扱った試料でない場合、エンドトキシンはガラス等器具(チューブ)からも持ち込みが問題となるようです。
特に試薬調製用のメスシリンダーやDDW(をいれたボトル等)からの混入には気を付けてください。ガラス器具からのエンドトキシン除去法は調べてください。
使い捨てのプラスチックチューブやピペットを使っていれば、実験の質にもよりますがさほど気にしなくても良いと思います。

無細胞タンパク発現系のエンドトキシンについて 削除/引用
No.4052-1 - 2015/04/24 (金) 17:50:38 - saba
初めまして、タンパク発現の実験をしていて疑問に思ったことがあるので質問させてください。

大腸菌を用いたタンパク発現ではエンドトキシンの産生が考えられます。
無細胞タンパク発現系を用いた場合、エンドトキシンの産生は考えられるのでしょうか?

私的には大腸菌を用いていないので、エンドトキシンが産生されることはないと思っています。なので、タンパク発現後にエンドトキシン測定をせずに使用しても良いのでは、と考えています。

作成したタンパク質は細胞に添加する予定です。

宜しければご回答よろしくお願い致します。

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