Bio Technical フォーラム

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pQE30とpQE31の違いについて トピック削除
No.4097-TOPIC - 2015/05/15 (金) 19:06:11 - プラスミド

いつもお世話になっています。

今回はHisタグによるタンパク精製を行いたいと思っているのですが、ベクターについて質問があります。
ベクターとして研究室に今ある、pQE30とpQE31のどちらかを使おうと考えているのですが、このふたつの違いがいまいち分かりません。
HandbookのThe QIAexpressionistを見ると、pQE31はpQE30のMCSの前にACの2塩基が付加されているだけのようなのですが、、、
このACが重要なのでしょうか?
初歩的な質問かもしれませんが分かる方、ご協力よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4097-3 - 2015/05/15 (金) 21:33:03 - プラスミド

なるほど、考えればわかることでしたね。
わざわざありがとうございます!!

(無題) 削除/引用
No.4097-2 - 2015/05/15 (金) 19:47:04 - AP
frame合わせのためでしょ。

インサートのreading frameとベクターにあるタグのreading frameがin-frameになるように繋げなければならないわけです。普通に制限酵素断端でligationする場合、とりうるframeは固定されてしまうわけです。しかし、1〜2塩基の挿入(欠失)のあるバージョンがあれば、in-frameになるベクターを選んで使うことが出来ます。

pQE30とpQE31の違いについて 削除/引用
No.4097-1 - 2015/05/15 (金) 19:06:11 - プラスミド

いつもお世話になっています。

今回はHisタグによるタンパク精製を行いたいと思っているのですが、ベクターについて質問があります。
ベクターとして研究室に今ある、pQE30とpQE31のどちらかを使おうと考えているのですが、このふたつの違いがいまいち分かりません。
HandbookのThe QIAexpressionistを見ると、pQE31はpQE30のMCSの前にACの2塩基が付加されているだけのようなのですが、、、
このACが重要なのでしょうか?
初歩的な質問かもしれませんが分かる方、ご協力よろしくお願いします。

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