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炎症細胞を染色して定量化する方法 トピック削除
No.4127-TOPIC - 2015/05/25 (月) 19:45:48 - showa
組織を採取・染色して、そこに浸潤している炎症細胞を定量化したいと思っています。まずHE染色をしてみたのですが、これで数えて定量化、としても良いのかどうか疑問です。

好中球とか分けずに炎症細胞全般ひとくくりにしてその浸潤量(炎症細胞の数 あるいは 浸潤面積など)を評価すれば今回のところは良いのですが、そのような先行論文が少なく迷っています。

HE染色では難しいのでしょうか。
炎症細胞だけをきれいに染める方法も他にあるのでしょうか。

またその他の炎症のマーカー(ILなど)をターゲットにすると、どんな方法があるかも教えてください。
 
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炎症細胞を染色して定量化する方法 削除/引用
No.4127-4 - 2015/06/01 (月) 10:40:08 - showa
返信が遅くなりすみません。
あいまいで初歩的な私の質問にお二方とも丁寧に答えて下さりありがとうございます。
自分が求めていた答えを頂き、とても参考になりました。
本当は免疫染色やフローサイトでしっかりやるべきなのでしょうが、
今回はHEで示す方法にしようと思います。

>HE染色の写真と写真中の好中球浸潤細胞数を示したグラフを使っている論文は色々あると思います

>定量せずにHE染色の写真だけで,こちらの方が強い炎症反応が認められた.とする方法もあると思います

>好中球がよく浸潤している。なんて論文も良くみかけます。

自分でもいろいろ調べたのですが、炎症の分野に詳しくないせいもあり、どうもうまいように上記のような論文が見つけられません。以下のものはあったのですが、他に代表的なものだけでも教えて頂けないでしょうか。お手数かけますがよろしくお願い致します。

http://jkms.org/DOIx.php?id=10.3346/jkms.2008.23.3.492 のFig4,5

(無題) 削除/引用
No.4127-3 - 2015/05/26 (火) 08:38:06 - alpha
どの程度の炎症で、どこの組織をHEで染めるかにもよると思いますが、「ざっくり」であれば、ある程度の炎症状態はわかると思います。
好中球がよく浸潤している。なんて論文も良くみかけます。
ただ、HEは細胞数をカウントする解析ではないですし、蛍光染色も同様です。
やはり得られる値は「ざっくり」だと思います。
個人的には、フローサイトでshowaさんが望む細胞のサブセットを単離・測定するほうが望ましいと思います。

(無題) 削除/引用
No.4127-2 - 2015/05/25 (月) 20:15:20 - よっしー
HE染色の写真と写真中の好中球浸潤細胞数を示したグラフを使っている論文は色々あると思います.
炎症細胞数というのが何を指しているのか分かりませんが,
CD11bで染色して好中球+マクロファージとしたり,Gr1で染色して好中球とする,あるいはTCRで染色してT細胞,CD45で白血球全般等々,方法はいろいろあると思いますが,そういうことではないのかな.

定量せずにHE染色の写真だけで,こちらの方が強い炎症反応が認められた.とする方法もあると思います.

炎症細胞を染色して定量化する方法 削除/引用
No.4127-1 - 2015/05/25 (月) 19:45:48 - showa
組織を採取・染色して、そこに浸潤している炎症細胞を定量化したいと思っています。まずHE染色をしてみたのですが、これで数えて定量化、としても良いのかどうか疑問です。

好中球とか分けずに炎症細胞全般ひとくくりにしてその浸潤量(炎症細胞の数 あるいは 浸潤面積など)を評価すれば今回のところは良いのですが、そのような先行論文が少なく迷っています。

HE染色では難しいのでしょうか。
炎症細胞だけをきれいに染める方法も他にあるのでしょうか。

またその他の炎症のマーカー(ILなど)をターゲットにすると、どんな方法があるかも教えてください。

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