Bio Technical フォーラム

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T3プロモーター⇒インサート配列⇐T7プロモータの転写 トピック削除
No.4240-TOPIC - 2015/07/02 (木) 22:06:11 - 天々
お世話になっております。
プロモーターと転写に関して質問がございます。

例えば以下の様な直鎖状配列があったとします。

T3プロモーター⇒ インサート配列 ⇐T7プロモーター

矢印はそれぞれのプロモーターの転写の向きを示しています。
この直鎖状DNAとT3,T7ポリメラーゼを一緒に作用させた場合どのようなRNAが生じるのでしょうか?

直鎖状DNAがポリメラーゼの量と比較して圧倒的に多い場合、2種類のRNAが生じると思います。
ポリメラーゼの量がDNAと比較して多い場合はどうでしょうか?
インサート配列の途中でT3,T7ポリメラーゼが出会うので転写が止まってしまうと考えているのですが、皆様どう思われますか?
宜しくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.4240-3 - 2015/07/03 (金) 00:20:19 - 天々
AP様、

素晴らしい回答を有難うございます!
そのような実例があるのですね。
感謝致します。

(無題) 削除/引用
No.4240-2 - 2015/07/02 (木) 22:57:03 - AP
RNAi用の二本鎖RNAをin vitroで合成する方法として、鋳型DNAの両端に同種あるいは異種のファージプロモーターをつけて、対応するポリメラーゼを同時に働かせるものがあります。
どの程度立体障害がおこるのかはわかりませんが、酵素が現に転写をしている部分では、鋳型DNAは一本鎖にほどけているはずなので、上りと下りが衝突することはないんじゃないでしょうか。

T3プロモーター⇒インサート配列⇐T7プロモータの転写 削除/引用
No.4240-1 - 2015/07/02 (木) 22:06:11 - 天々
お世話になっております。
プロモーターと転写に関して質問がございます。

例えば以下の様な直鎖状配列があったとします。

T3プロモーター⇒ インサート配列 ⇐T7プロモーター

矢印はそれぞれのプロモーターの転写の向きを示しています。
この直鎖状DNAとT3,T7ポリメラーゼを一緒に作用させた場合どのようなRNAが生じるのでしょうか?

直鎖状DNAがポリメラーゼの量と比較して圧倒的に多い場合、2種類のRNAが生じると思います。
ポリメラーゼの量がDNAと比較して多い場合はどうでしょうか?
インサート配列の途中でT3,T7ポリメラーゼが出会うので転写が止まってしまうと考えているのですが、皆様どう思われますか?
宜しくお願い致します。

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