Bio Technical フォーラム

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lncRNA発現ベクター トピック削除
No.4285-TOPIC - 2015/07/21 (火) 07:31:06 - 学生A
lncRNAの作用を見るためGain of functionの実験を計画しています。
Non coding RNAを発現させるにはそのcDNAをpcDNA3などのベクターに入れるだけでできるのでしょうか?もちろんタンパクをコードしていないためRNAとして発現させることができるものと考えていますが、タンパクのように停止codonのような、「ここまで」という印になる配列等あるのでしょうか?

説明下手でスミマセンがよろしくお願いいたします。
 
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No.4285-4 - 2015/07/21 (火) 22:29:16 - 学生A
>おおさん
目的の遺伝子はpolyAはつかないです。
一度クローニングして発現させてみます。
初めての試みですので良い結果が出ればまた投稿させていただきます。
お返事いただきどうもありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.4285-3 - 2015/07/21 (火) 11:43:39 - おお
詳細がわかってないものだったら、プロモーターの部分をvectorのconstitutiveなものにして、そのRNAがコードされているゲノム領域をいくらか3'末端ようゆうをもってPCRなどでとってきてベクターに入れるという手が取れるかもしれない。

(無題) 削除/引用
No.4285-2 - 2015/07/21 (火) 11:38:46 - おお
できるばあいもあるし、できないばあいもあるとおもう。polyAがつくタイプならそれでたぶんできるかなぁという気がする。

lncRNA発現ベクター 削除/引用
No.4285-1 - 2015/07/21 (火) 07:31:06 - 学生A
lncRNAの作用を見るためGain of functionの実験を計画しています。
Non coding RNAを発現させるにはそのcDNAをpcDNA3などのベクターに入れるだけでできるのでしょうか?もちろんタンパクをコードしていないためRNAとして発現させることができるものと考えていますが、タンパクのように停止codonのような、「ここまで」という印になる配列等あるのでしょうか?

説明下手でスミマセンがよろしくお願いいたします。

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