Bio Technical フォーラム

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マイクロキャリアを用いた細胞培養 トピック削除
No.4321-TOPIC - 2015/08/06 (木) 16:09:15 - ホリ
Cytodexというマイクロキャリアを用いて初めて細胞培養を行ってみようと考えているのですが、マイクロキャリアへの細胞の接着頻度や増殖速度を知りたいと思っています。そこで播種後にマイクロキャリアへ接着した細胞と接着していない細胞との分離、さらにはマイクロキャリアからトリプシン処理した後の細胞とマイクロキャリアとの分離はどのようにしたらよいのでしょうか?ご経験のある方、プロトコールなどありましたらご教授いただけないでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.4321-3 - 2015/08/08 (土) 02:34:47 - おお
ttps://www.gelifesciences.com/gehcls_images/GELS/Related%20Content/Files/1314716762536/litdoc18114062_20140122072109.pdf

128ページぐらいのところだったかな。。。
8.5.2 Counting cells released after trypsinization

8.5.3 Counting released nuclei

GEがちゃんとまとめているじゃないか。

(無題) 削除/引用
No.4321-2 - 2015/08/08 (土) 02:27:52 - おお
>[Re:1] ホリさんは書きました :
> Cytodexというマイクロキャリアを用いて初めて細胞培養を行ってみようと考えているのですが、マイクロキャリアへの細胞の接着頻度や増殖速度を知りたいと思っています。そこで播種後にマイクロキャリアへ接着した細胞と接着していない細胞との分離、

そこそこのサイズだし、静置でわかれるんじゃないか。どうしてもというのならパーコールなど使う手もあるでしょうけど。



>さらにはマイクロキャリアからトリプシン処理した後の細胞とマイクロキャリアとの分離はどのようにしたらよいのでしょうか?ご経験のある方、プロトコールなどありましたらご教授いただけないでしょうか?

絶対に数えないといけないのかちょっとかんがえてください。

MTTなどの試薬で細胞の酵素活性で数を見積もったり、DNA量で見積もったりといろいろオプションはありますので。もちろん数を数えるほうが確実ですけど、そう言う意味で相関性をとってから試薬を使う人もいますけど。

マイクロキャリアを用いた細胞培養 削除/引用
No.4321-1 - 2015/08/06 (木) 16:09:15 - ホリ
Cytodexというマイクロキャリアを用いて初めて細胞培養を行ってみようと考えているのですが、マイクロキャリアへの細胞の接着頻度や増殖速度を知りたいと思っています。そこで播種後にマイクロキャリアへ接着した細胞と接着していない細胞との分離、さらにはマイクロキャリアからトリプシン処理した後の細胞とマイクロキャリアとの分離はどのようにしたらよいのでしょうか?ご経験のある方、プロトコールなどありましたらご教授いただけないでしょうか?

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