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(無題) 削除/引用 No.4335-2 - 2015/08/13 (木) 10:39:43 - AP 過酸化水素を分解すると活性酸素が生じてタンパク質等がアタックされます。最もアタックを受けるのがperoxidase（PO) 自体というわけです。 PO標識抗体/ルミノール系の化学発光でWBの検出を行なうとき、一般的に露光時間（検出時間）を伸ばすのには限界があります。それは反応開始から数分から十数分で失活が進んでしまうからです。近年、長時間発光が可能であるという製品が出ていますが、なにかしらのラジカルスカベンジャーが添加されている模様です。 ちなみに、内在性POを失活させるのにはsodium azideを併用するのも一般的ですね。

内在性ペルオキシダーゼをブロックすることについて 削除/引用 No.4335-1 - 2015/08/13 (木) 09:57:12 - IHC 免疫組織染色（IHC）について教えてください。 DABという過酸化水素依存的な基質を使って、ペルオキシダーゼラベルされた二次抗体を可視化したいです。このためにまず、内在性ペルオキシダーゼをブロックすることが、バックグラウンドを下げるために必要だそうです。 ここで疑問なのですが、いわゆる「酵素」というものは酵素反応後であっても量は変わらないと高校でならいました。 今回、内在性ペルオキシダーゼをブロックするため組織切片を３％過酸化水素で10分処理するようですが、これでなぜ失活（？）するのでしょうか？ 酵素の量は変わらないけど、酵素が壊れてします（？）ため失活するということでしょうか？ 非常に稚拙な質問で恐縮ですがよろしくお願いします。

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