Bio Technical フォーラム

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コラゲナーゼ処理 トピック削除
No.4389-TOPIC - 2015/09/02 (水) 09:07:02 - お世話になります
初歩的な質問で申し訳ありません。

組織からコラゲナーゼで細胞に分離してフローサイトメトリーである膜タンパク質の発現を確認しようとしているのですが、何度やっても発現が認められません。
コラゲナーゼ処理で膜タンパクが消退することはあるのでしょうか?

また、そのような場合、コラゲナーゼ処理しwash後1時間ぐらい静置しておけば、またそのタンパクが発現し、フローサイトで評価できるようなことがあるのでしょうか?
 
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コラーゲナーゼ処理 削除/引用
No.4389-3 - 2015/09/07 (月) 11:27:34 - 方法は違いますが
昔、組織から細胞を分離するには、まずはさみでチョキチョキと細かく組織をバラバラにして、ステンレスメッシュでろ過しました。

外国製品でしたが、まだ売られているようです。(下記参考)メッシュは取り外しがきいて、オートクレーブ滅菌ができて、ろ過するのに先のフラットなガラス棒がついていました。
価格は少し高かったと思いますが、本当に便利でした。参考にしてください。

http://www.wakenbtech.co.jp/index.php?page=shop.product_details&flypage=shop.flypage&product_id=261&option=com_virtuemart&Itemid=29

(無題) 削除/引用
No.4389-2 - 2015/09/02 (水) 10:42:15 - ccc
> コラゲナーゼ処理で膜タンパクが消退することはあるのでしょうか?

タンパク質によってはあります

> また、そのような場合、コラゲナーゼ処理しwash後1時間ぐらい静置しておけば、またそのタンパクが発現し、フローサイトで評価できるようなことがあるのでしょうか?

タンパク質によってはあります

コラゲナーゼ処理 削除/引用
No.4389-1 - 2015/09/02 (水) 09:07:02 - お世話になります
初歩的な質問で申し訳ありません。

組織からコラゲナーゼで細胞に分離してフローサイトメトリーである膜タンパク質の発現を確認しようとしているのですが、何度やっても発現が認められません。
コラゲナーゼ処理で膜タンパクが消退することはあるのでしょうか?

また、そのような場合、コラゲナーゼ処理しwash後1時間ぐらい静置しておけば、またそのタンパクが発現し、フローサイトで評価できるようなことがあるのでしょうか?

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