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リンパ芽球培養用の血清 トピック削除
No.4412-TOPIC - 2015/09/10 (木) 23:12:29 - のろ
末梢血をEBウィルス感染させて作成するBリンパ芽球(LCL)を作製しています。以前からラボでキープしていたロットの血清(FBS)が間もなくなくなりそうになり、ロットを確認したら、古いのでもうありませんとの回答でした。新たにロットチェックして用いようと思いますが、一般的にLCL用のFBSは他の接着細胞等と同様に普通のFBSでよいのでしょうか。また、特にエンドトキシンなどが低いとか、リンパ球だからこういうものの方がよりよい、というものがあれば、この機会なので試していいものにしたいと思っています。
何かアドバイスがあれば、よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4412-5 - 2015/09/11 (金) 22:26:51 - のろ
>ema様

返信ありがとうございます。
先にセルラインや幹細胞の扱いがあるのでロットチェックの必要性については十分わかっています。ただ、リンパ球で使用している血清のグレードやメーカーについて知識がなかったため、何か特性があるのか、またはどんなメーカーであろうと単にロットチェックでgrowthの相性が良ければいいのか、知りたかったという質問です。
当方でも調べましたが、リンパ球では血清にこだわりがないようですね。というか、リンパ球用無血清培地もあるようですね。さほど特殊な血清である必要がないなら、例えばGi○coさんの通常の血清でロットチェックし相性の良いものを選ぶなどしたいと思います。

(無題) 削除/引用
No.4412-4 - 2015/09/11 (金) 22:22:29 - のろ
>lcl様

返答ありがとうございます。
記載忘れましたが、もちろん新規の血清購入となるのでロットチェックは行う予定でいます。ただ、ロットチェックするにしても血清はどのグレードでどのメーカーとか、リンパ球に関してはよく知りませんでしたので…(当方は通常のセルライン、幹細胞はすでに扱っています。)

ちなみにlclさんは10%で添加しているFBSはどのメーカーのどのFBSか、差し支えなければ教えていただけませんでしょうか(このサイト上で問題ない程度で)。こちらでロットチェック用を取り寄せてどのロットでGrowthがよいかみたいと思います。

ロットの違いがあるのでサンプル 削除/引用
No.4412-3 - 2015/09/11 (金) 13:43:12 - ema
同型番、同様な品質記載(というか一定のレベル以下のものは販売してないと思います)でも、ロットによって書いてないレベルの物質で、増殖・感染率等がかわるので、ロットサンプルをもらってチェックして、良ければ、そのロットを実験終了数年分キープ(お金があれば全部キープ)くらいの気持ちでいないと、過去とデータが違う?と思うことがあります。

(無題) 削除/引用
No.4412-2 - 2015/09/11 (金) 00:11:50 - lcl
今LCLを飼っています。
血清のロットの影響はあると思います。

これまで三つの異なる血清を用いましたが、一つのロットのみ全く増殖しませんでした。細胞は死んではいないようでしたが。

私はRPMI1640に10%血清(特別lcl用だとか、そういうんじゃないです。)にP, Sを加えたもので培養しています。

リンパ芽球培養用の血清 削除/引用
No.4412-1 - 2015/09/10 (木) 23:12:29 - のろ
末梢血をEBウィルス感染させて作成するBリンパ芽球(LCL)を作製しています。以前からラボでキープしていたロットの血清(FBS)が間もなくなくなりそうになり、ロットを確認したら、古いのでもうありませんとの回答でした。新たにロットチェックして用いようと思いますが、一般的にLCL用のFBSは他の接着細胞等と同様に普通のFBSでよいのでしょうか。また、特にエンドトキシンなどが低いとか、リンパ球だからこういうものの方がよりよい、というものがあれば、この機会なので試していいものにしたいと思っています。
何かアドバイスがあれば、よろしくお願いいたします。

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