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ポジティブコントロールの作製 トピック削除
No.4437-TOPIC - 2015/09/23 (水) 18:40:03 - さと
ウエスタンで実験を行う際に、p27のポジティブコントロールをアプライしようと考えています。今までポジティブコントロールを作製した経験はありませんが、培養している細胞に何らかの薬剤を投与して、p27の発現を強制的に上昇させ、それをポジティブコントロールとしようと考えています。
p27のポジティブコントロール作製に関して論文検索をかけたりしているのですが、なかなか見つからず困っています。
もちろんどの細胞を使うのかにもよるとは思いますが、p27のポジティブコントロール作製に関してアドバイスまたはご存知の論文があれば教えて頂きたく、こちらに書かせて頂きました。
よろしくお願いいたします。
 
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No.4437-7 - 2015/09/24 (木) 17:54:26 - pp
持ってる抗体のデータシートとか、Santa CruzやCST、Abcamの抗体の情報を見れば、発現が高い細胞がわかります。メーカーによっては細胞のlysateも売ってるので、抗体のポジコンという意味では一番手頃で簡単です。

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No.4437-6 - 2015/09/24 (木) 14:18:36 - おお
なので場合によってはネガコンの方が必要だったり、、、

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No.4437-5 - 2015/09/24 (木) 14:09:42 - おお
そうなんですよねぇ。。。ポジコンっていわれても、どういうことを示したいのかでかわるわけで、、、

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No.4437-4 - 2015/09/24 (木) 13:38:43 - 小言幸兵衛
そのウエスタンでp27が検出できるのか、どのバンドがp27なのかを確認するためのポジティブコントロールなら、p27の発現プラスミドをトランスフェクションしてやるのが簡単では。

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No.4437-3 - 2015/09/23 (水) 22:33:12 - おお
cell cycle inhibitorのp27ですか?
それともなにかほかのものでしょうか。
通常の培養では全く検出されないのでしょうか?
cell cycle inhibitorのp27ならcontact inhibitionであがるという報告があるけど。

(無題) 削除/引用
No.4437-2 - 2015/09/23 (水) 21:14:26 - yk
ねがこんもわすれずに。

ポジティブコントロールの作製 削除/引用
No.4437-1 - 2015/09/23 (水) 18:40:03 - さと
ウエスタンで実験を行う際に、p27のポジティブコントロールをアプライしようと考えています。今までポジティブコントロールを作製した経験はありませんが、培養している細胞に何らかの薬剤を投与して、p27の発現を強制的に上昇させ、それをポジティブコントロールとしようと考えています。
p27のポジティブコントロール作製に関して論文検索をかけたりしているのですが、なかなか見つからず困っています。
もちろんどの細胞を使うのかにもよるとは思いますが、p27のポジティブコントロール作製に関してアドバイスまたはご存知の論文があれば教えて頂きたく、こちらに書かせて頂きました。
よろしくお願いいたします。

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