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(無題) 削除/引用 No.4560-7 - 2015/11/07 (土) 23:32:57 - CHOだったか3T3だったか FuGene6を使ってトランスフェクションしています。一度、ペニシリンストレプトマイシン入りのメディウムを使った時に、細胞が死にまくったことがあります。 どの細胞だったか忘れてしまいましたが。293だったか、CHOだったか、3T3-L1だったか。

(無題) 削除/引用 No.4560-6 - 2015/11/06 (金) 22:42:58 - 年寄り ちょっと違いますがロッシュでは、こうなってますね。 抗生物質(ペニシリン・ストレプトマイシン・ファンギゾンなど)の存在下で細胞を培養すると、トランスフェクション効率が最大で25%も低下することがあるので、一過性トランスフェクションを行う場合には、これらの抗生物質を含まない培地の使用が理想的です。 http://roche-biochem.jp/sis/2010/07/post-112.html lipofectamine2000が販売される前にLipofectamineと言う試薬が販売されていたのですが、毒性が高かったので抗生物質を入れないプロトコールが推奨されていたと記憶しています。2000になって毒性の問題が解決した今もその名残で記載されているのではないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.4560-5 - 2015/11/06 (金) 17:54:28 - とらこ コメントありがとうございます。 トピ主のとらこです。No.4560-3とは別の方です。 なんと、Thermofisherから抗生物質なしでもいいとかかれていたのですね。 一方で他のページのlipofectamin2000関連では Do not add antibiotics to media during transfection as this causes cell death. とも書かれていたので混乱してしまいます。 試薬によるとかですかね。 でも、実際に抗生物質が毒性を示したというデータや経験をしたヒトは、やはりいないのですかね。

(無題) 削除/引用 No.4560-4 - 2015/11/06 (金) 15:37:50 - おお 感覚としてはあまり抗生物質で毒性がでてるようではないので、まあ抜けるときは抜いておこうていどです。抗生物質ぬきとか、通常培養用とかボトルが増えるだけで、transfectionをやらない実験にしふとすると抗生物質抜き培地だけが長期間のこっていて結局捨てるとかいうはめにもなるので。 昔のプロとコールは特に抗生物質については指示がありましたけど、今の試薬のproduct sheet/manualとかどうかいてるんでしょうかねぇ。。。 細胞によるかもしれませんが、たいてはよく飼い慣らされている有名なcell lineを使うことが多いので。。。

(無題) 削除/引用 No.4560-3 - 2015/11/06 (金) 15:24:37 - とらこ おおさんありがとうございます。実際におおさんは抗生剤抜きでやられてますか？そしてそもそもなぜ抗生剤抜きでやるように、との勧めがあったんでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.4560-2 - 2015/11/06 (金) 13:16:21 - おお https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/transfection/transfection-support/transfection-reagent-faqs.html Can antibiotics be used in media during transfection? Yes, we have compared transfecting cells in media with and without antibiotics in multiple cell lines and assessed the transfection efficiency and toxicity and found no difference.

トファンスフェクション時の抗生物質 削除/引用 No.4560-1 - 2015/11/06 (金) 12:31:04 - とらこ リポフェクタミンなどを使用したトランシフェクション時には、血清入りの通常培地でから抗生物質（ペニシリンストレプトマイシン）を除いた培地がインストラクションで推奨されていますが、実際に抗生物質なしで使用してますでしょうか？ 過去に、自分で抗生物質入りを試して、特にトランスフェクション効率に大きな変化はなかったのですが、死細胞の率とか調べたことないので、本当に抗生物質入りが何かに影響するのかいまいち不明です。 みなさんは実際に抗生物質ありでトランスフェクションに影響でた方はいらっしゃいますか？ご意見いただけるとうれしいです。

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