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(無題) 削除/引用 No.4618-6 - 2015/12/08 (火) 21:49:13 - 寛太 P0でいいなら、出産直前に母親ごと還流するのが最強です。

(無題) 削除/引用 No.4618-5 - 2015/12/01 (火) 08:29:14 - シジュルカ AA様 なるほど、新生仔の場合でも開胸されているのですね。 血色の変わり具合等に注意して、一度試してみます。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.4618-4 - 2015/12/01 (火) 02:37:08 - AA 新生仔の場合でも開胸して針をさしています。 ペリスタポンプを使っていますが、シリンジでも問題はないかと思います。 ただ、針は翼状針などチューブで延長したものを使ったほうが良いかと思います。 プランジャーを押しこむ時にはどうしても針先が動きますので。

(無題) 削除/引用 No.4618-3 - 2015/11/30 (月) 19:30:15 - シジュルカ AA様 早速のご回答ありがとうございます。 言葉足らずですみません。胎生14日目は還流固定せず、そのままPFA漬けにしていました。 新生仔の場合も成体と同様に、開胸して操作されているのでしょうか？皮膚が薄い分、心臓の位置が分かる気もするのですが。。 ストッパー付のシリンジで注入されているということは、新生仔に対してシリンジを直接刺して、手動でゆっくり固定液を注入するという認識でよろしかったでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.4618-2 - 2015/11/30 (月) 17:51:47 - AA 胎生14日の還流ができるのであれば特に問題ないと思いますが、、、 一応私は、不慣れなうちは針先2-3mmのところにビニールテープで ストッパーを作り、刺し過ぎないようにしていました。 また、針は30G（手持ちで一番細かった）で、PBSによる脱血は行わず、 いきなり固定液から流し、還流し切るまで針は手で保持しています。 感じ方は人それぞれだと思いますが、うまく行っていれば 還流開始からすぐに目に見えて皮下の血管から色が抜けるので 個人的には新生児はわかりやすいと思います。

マウス新生仔の還流固定 削除/引用 No.4618-1 - 2015/11/30 (月) 15:48:36 - シジュルカ マウス新生仔の脳切片を作製し、免疫染色をしたいと考えております。 これまでは新鮮凍結切片をPFAで前もしくは後固定することによって染色していたのですが、血管等の非特異反応が見られます。 これまでは成体マウスでの還流固定は行ったことがあります。また、胎生14日ぐらいまもであります。 新生仔マウスはサイズも小さいのですが、還流固定の際のコツや見るべきポイント等があればご教授お願いできないでしょうか。見たい組織部位は脳のみとなります。

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