Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

SDS-PAGEのゲル 作り立てはダメ? トピック削除
No.4736-TOPIC - 2016/01/12 (火) 21:16:59 - たいぞう
お世話になります。
SDS-PAGEのゲルですが、作り立てより少し寝かせた(重合させた)方が良いと聞き、いつも前日に作って、冷蔵保存して翌日泳動しています。
今回時間が無くて、当日に泳動したいのですが、作ってどれくらい時間をおけばよいのでしょうか?
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



8件 ( 1 〜 8 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.4736-8 - 2016/01/12 (火) 23:54:40 - AP
そういう話は聞いたことないんだけれど、ゲルが固まった直後は、まだAPSやTEMEDのラジカルが残留していて悪さをするのかも。一晩置くことで緩やかに酸化されてラジカルが除去されるのかも。

シークエンスをスラブゲルでやっていた時代、逆に作成後、間を置かないで泳動するように言われていた。ただし、プレランをするのが普通だったので、電荷を持つ不純物はそれでゲルから排除されていたわけだが。不連続系のSDS-PAGEではできないけど。まあ、少なくともゲルの分画範囲の中庸に位置するタンパク質なら作成直後でも大差ないと思います。それで変な結果になったという経験ないので。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.4736-7 - 2016/01/12 (火) 23:29:26 - たいぞう
皆さま、お返事有難うございます!
こんなに遅い時間なのに感激です。
明日、続けてウェスタンブロットまでやってみようと思います。
問題が起きましたら、また質問させていただきます。

このフォーラムのおかげで心強いです。
本当に有難うございました。

(無題) 削除/引用
No.4736-6 - 2016/01/12 (火) 23:14:41 - あqswでfrgthyじゅいこlp;
直後も数日後のやってるけどそれで、結果にあきらかな違いは見たことない、てか同じに見える。

(無題) 削除/引用
No.4736-5 - 2016/01/12 (火) 23:01:12 - おお
作って固まったるすぐに流しちゃう人も多いと思います。わたしは一晩以上冷蔵庫に保存した物を使うようにしています。寝かしておいたほうが泳動パターンをみると寝かしてないのとちょっと違いゲルがしまってるなって思います。低分子あたりの分解能が若干違うって感じでしょうか。寝かしている間に重合が進んでるんでしょう。

(無題) 削除/引用
No.4736-4 - 2016/01/12 (火) 22:42:14 - tana
用途はCBB染色とウエスタンブロットでしたけど、いつも作りたてのゲルで流して問題が起きたことないです。
作って30min-1hrくらいで固まったなと思ったら使ってました。

(無題) 削除/引用
No.4736-3 - 2016/01/12 (火) 22:30:25 - たいぞう
遅い時間にもかかわらずお返事有難うございます。
明日ゲルを作って、数時間置いて、続けて泳動をして、ウェスタンブロットをしたいと思っています。
3時間くらい寝かせれば大丈夫でしょうか?

(無題) 削除/引用
No.4736-2 - 2016/01/12 (火) 22:05:08 - 中年
MS解析のためのSDS-PAGEなどでなければ問題ないと思うけど。

SDS-PAGEのゲル 作り立てはダメ? 削除/引用
No.4736-1 - 2016/01/12 (火) 21:16:59 - たいぞう
お世話になります。
SDS-PAGEのゲルですが、作り立てより少し寝かせた(重合させた)方が良いと聞き、いつも前日に作って、冷蔵保存して翌日泳動しています。
今回時間が無くて、当日に泳動したいのですが、作ってどれくらい時間をおけばよいのでしょうか?

8件 ( 1 〜 8 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。