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(無題) 削除/引用 No.477-3 - 2012/05/07 (月) 13:40:04 - さく 回答ありがとうございます。 アフィニティーカラムでIgAを濃縮してから再度チャレンジしてみようと思います。 ポジコンについては何か設定できる実験方法を考えてみます。

(無題) 削除/引用 No.477-2 - 2012/05/02 (水) 10:56:28 - 挽きたて ファージは、ペプチドをディスプレイしているのでしょうか。 そうだとすると、IgG抗体に比べ親和性は低いので抗原となるSIgAの量が少ないと検出できない可能性があります。抗SIgA-抗体の1/10以下の感度である可能性もありますよ。 唾液中のSIgA量は、MoAb.anti.h.IgAを飽和させる量のどれくらいでしょうか？ 最低でも10%ほどないと検出が難しいかもしれません。 posiive-controlを設定出来ないので評価が難しいとは思います。

ELISAによる特異的phageの検出について 削除/引用 No.477-1 - 2012/05/01 (火) 10:17:19 - さく 失礼します。 現在、ファージディスプレイを用いてSIgAと結合するファージを単離しようと考えています。 �@Magnet-Avidin�Abiotin-MoAb.anti.hIgA�B唾液�Cファージといった順に免疫沈降させてpanningしています。 panningしたファージクローンからより特異的なものをELISAによって検出しようと思うのですが、感度足りないせいか、なかなか上手くいきません。 �@MoAb.anti.h.IgA �Aブロック液 �B唾液 �Cファージクローン �Dbiotin-anti.fd phage �EHRP-Avidin �FABTS の順にT-TBSで洗浄しながら行なっているのですが、発色感度以下なのかS/N比が取れません。 皆様の知識や経験のなかにヒントがございましたら、ご享受のほどよろしくお願いいたします。

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