Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

ラダーワンについて トピック削除
No.4833-TOPIC - 2016/02/09 (火) 22:46:04 - a
現在,アガロースゲル電気泳動で ナカライテスクの1kbpDNAラダーワンを使用しています.
説明書をみると,1kbpと3kbpがDNAの量が多く観察した時に一番光ると記載されているのですが,実際電気泳動の画像を見てみますと,下の方のバンド(0.3kbp,0.5kbp)が一番光っています.
なぜこのような結果になるのか分からず困っています.何か考えられる原因があるでしょうか
ご指摘,ご指導の程よろしくお願いいたします.

※0.7%アガロースゲルを使用し,100v,30minでいつも泳動を行っています.
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



9件 ( 1 〜 9 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.4833-9 - 2016/02/10 (水) 20:49:31 - 小言幸兵衛
え? 解決したの? 結局何が原因だったの?

(無題) 削除/引用
No.4833-8 - 2016/02/10 (水) 19:34:06 - a
皆さまご指摘どうもありとうございました.
非常に勉強になりました.

(無題) 削除/引用
No.4833-7 - 2016/02/10 (水) 12:30:10 - WoW
とりあえず後染め試してみたらどうでせう

(無題) 削除/引用
No.4833-6 - 2016/02/10 (水) 11:44:00 - AP
>BPBの蛍光のかぶりを見誤っているとはどういうことでしょうか.

紫外線励起だとトラッキング色素のBPBが光り、位置もちょうどその辺なので、もしやと

(無題) 削除/引用
No.4833-5 - 2016/02/10 (水) 10:49:58 - あ
低分子量の方が先に動くのでGelRedの結合が多く,高分子はその後に動くので結合するGelRedの量が少ない.
もしくは
低分子量はバンドがぼやけて太く,高分子はバンドがぼやけずに細い,露光時間が長くどちらも輝度が飽和しており,バンドが太い方が輝いて見える.
かな

(無題) 削除/引用
No.4833-4 - 2016/02/09 (火) 23:52:01 - a
AP様

ゲルを作製する際にEtBrではなくGelRedを加えています.
後染めではありません.

BPBの蛍光のかぶりを見誤っているとはどういうことでしょうか.

(無題) 削除/引用
No.4833-3 - 2016/02/09 (火) 23:24:49 - AP
染色方法は?
ゲルにEtBr? 後染め?
BPBの蛍光のかぶりを見誤っていない?

(無題) 削除/引用
No.4833-2 - 2016/02/09 (火) 22:50:01 - 中年
ヌクレアーゼがコンタミしてデグってるとか?
10mMもEDTAが入ってるからちょっと考えにくいところですが。

ラダーワンについて 削除/引用
No.4833-1 - 2016/02/09 (火) 22:46:04 - a
現在,アガロースゲル電気泳動で ナカライテスクの1kbpDNAラダーワンを使用しています.
説明書をみると,1kbpと3kbpがDNAの量が多く観察した時に一番光ると記載されているのですが,実際電気泳動の画像を見てみますと,下の方のバンド(0.3kbp,0.5kbp)が一番光っています.
なぜこのような結果になるのか分からず困っています.何か考えられる原因があるでしょうか
ご指摘,ご指導の程よろしくお願いいたします.

※0.7%アガロースゲルを使用し,100v,30minでいつも泳動を行っています.

9件 ( 1 〜 9 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。