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レンチウイルスを用いた培養細胞へのランダム変異導入 トピック削除
No.4836-TOPIC - 2016/02/10 (水) 21:06:05 - スクリーニング
一倍体のヒト培養細胞にレンチウイルスを感染させることで
ランダム変異導入しようと考えています。

色々調べてみるとジーントラップベクター
(プロモーターレス,PolyAトラップ)を用いて,
ランダム変異導入する方法がよく行われているようです。

ここで疑問なのですが,なぜわざわざジーントラップベクターを使用する必要があるのでしょうか?そもそも普通にレンチウイルスを感染させたら,
ランダム変異導入されるのではないのでしょうか?

ご存じの方がいらっしゃいましたら教えていただけますと嬉しいです。
 
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なるほど 削除/引用
No.4836-4 - 2016/02/11 (木) 12:13:09 - スクリーニング
独り言さん,おおさん,ありがとうございました。

とても良くわかりました!
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.4836-3 - 2016/02/11 (木) 02:52:46 - おお
独り言さんがすでに指摘していますが、言葉を変えると、イントロンの領域がゲノムのほとんどを占めているので、イントロンに入って、何ら影響もない挿入をもったクローンがたくさんできるのを避けるためということだと思います。もちろんイントロンにはいって何ら影響もないかと言うのは視点をかえるとそうでないかもしれませんが、それは実験の目的と現実性の兼ね合いかと。

(無題) 削除/引用
No.4836-2 - 2016/02/10 (水) 22:05:34 - 独り言
レンチウイルスでランダム変異導入というのは、遺伝子のcoding regionにウイルスの遺伝子が挿入されて、遺伝子をつぶすということですか?

トラップベクターに比べて、メチャメチャ効率がさがることになると思います。だってイントロンに比べてcoding regionの長さはかなり短いでしょ。というか、ウイルスでランダム変異導入というのは、聞いたことないのでよくわからないけど。そういうことなんじゃない。

レンチウイルスを用いた培養細胞へのランダム変異導入 削除/引用
No.4836-1 - 2016/02/10 (水) 21:06:05 - スクリーニング
一倍体のヒト培養細胞にレンチウイルスを感染させることで
ランダム変異導入しようと考えています。

色々調べてみるとジーントラップベクター
(プロモーターレス,PolyAトラップ)を用いて,
ランダム変異導入する方法がよく行われているようです。

ここで疑問なのですが,なぜわざわざジーントラップベクターを使用する必要があるのでしょうか?そもそも普通にレンチウイルスを感染させたら,
ランダム変異導入されるのではないのでしょうか?

ご存じの方がいらっしゃいましたら教えていただけますと嬉しいです。

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