Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

MitoTracker Deep Red FMについて トピック削除
No.4962-TOPIC - 2016/04/02 (土) 23:20:03 - なな
いつも参考にさせていただいています。
ある細胞の代謝変化とその活性をテーマに研究をしています。
2-NBDGとMitoTracker Deep Redを用いて、細胞を染色し2-NBDG取り込みとミトコンドリアのmassを測定しています。
MitoTracker Deep Redが上昇しているときは、ミトコンドリアのmassが増加していることを意味していますが、「酸化的リン酸化が活性化している」と予想してよいのでしょうか?massの変化は、機能的には何を意味しているのでしょうか?
他の実験結果が示唆する酸化的リン酸化の活性と、MitoTracker Deep Redの増減が一致しないところがあり、解釈に困っています。
知識をお持ちの方がみえましたら、アドバイスいただけると幸いです。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.4962-5 - 2016/04/14 (木) 23:54:26 - なな
おおさん、ありがとうございます。
あまりミトコンドリアに関しては知識がないので、もう少しいろいろ勉強してみます。
OXPHOSに関しては、Seahorseなどを用いた機能解析を検討します。
MitoTracker Deep Redの結果で、機能的なことまで結論付けようとするのが強引ですよね。

(無題) 削除/引用
No.4962-4 - 2016/04/05 (火) 03:17:51 - おお
Massにかんしてはおっしゃるようにそうして測定したとする論文はあるかと思います。ただこの手のラベルはミトコンドリアの生理状態に依存するので、均一にラベルされているか注意が必要かなぁと思った次第です。図り方も、蛍光がある部分の体積を計算するか(これは一般的なコンフォーカルではかなり難しいかも)、蛍光強度だけで図るかでも違ってくる可能性がありますよね。

>一般的に「massが減少してOXPHOSが活性化する」という現象は起こりうるのでしょうか?
あまり詳しくは調べたことがないので、なんとも言い様がないのですが、Massとかを決めるファクターなどふくめてそんなに詳しくミトコンドリアの振る舞いがわかっているでしょうか?
あとたぶんこれはおわかりかと思いますが、OXPHOSの活性をミトコンドリア蛋白あたりで図っているか、細胞の蛋白あたりではかっているかも解釈に影響を与えるところですよね。

(無題) 削除/引用
No.4962-3 - 2016/04/03 (日) 21:30:54 - なな
おおさん、ありがとうございます。

MitoTracker Deep Redでmassを評価している論文がいくつかあったので、massの評価に用いているものだと思っていました。では、MitoTracker Deep Redは何を評価しているのでしょうか?
また、一般的に「massが減少してOXPHOSが活性化する」という現象は起こりうるのでしょうか?
いろいろ質問して申し訳ございませんが、ご存じでしたら教えていただけると幸いです。

(無題) 削除/引用
No.4962-2 - 2016/04/03 (日) 07:21:40 - おお
MitoTracker Deep Redの取り込みがMassを表すかは微妙ですが、Massが増えれば酸化的リン酸化が活性化しているというわけでもないと思います。ミトコンドリアの機能はATP産生だけでないですよね。

MitoTracker Deep Red FMについて 削除/引用
No.4962-1 - 2016/04/02 (土) 23:20:03 - なな
いつも参考にさせていただいています。
ある細胞の代謝変化とその活性をテーマに研究をしています。
2-NBDGとMitoTracker Deep Redを用いて、細胞を染色し2-NBDG取り込みとミトコンドリアのmassを測定しています。
MitoTracker Deep Redが上昇しているときは、ミトコンドリアのmassが増加していることを意味していますが、「酸化的リン酸化が活性化している」と予想してよいのでしょうか?massの変化は、機能的には何を意味しているのでしょうか?
他の実験結果が示唆する酸化的リン酸化の活性と、MitoTracker Deep Redの増減が一致しないところがあり、解釈に困っています。
知識をお持ちの方がみえましたら、アドバイスいただけると幸いです。

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。