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Th1/Th2細胞への分化の評価 トピック削除
No.4963-TOPIC - 2016/04/03 (日) 11:27:55 - 教えて偉いヒト
ナイーブCD4細胞(CD45RA+CCR7+)をin vivo、in vitroのそれぞれである刺激を与えて、Th1/Th2への分化誘導を評価したいと考えています。
細胞内染色によるFACSとELISA(IFN-gamma、Il-4など)しか解析方法は思いつかないのですが、そもそも何をもって「T細胞がTh1(Th2)方向に誘導された」と言えるのでしょうか。例えばコントロールとの比較をするにしても、どの程度サイトカインの分泌が確認できれば良いのか判断しかねています。
免疫分野での研究はまったくの無知で、的外れな質問でしたら申し訳ありません。
宜しくお願い致します。
 
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ありがとうございました 削除/引用
No.4963-4 - 2016/04/05 (火) 10:39:58 - 教えて偉いヒト
皆様、貴重な御意見ありがとうございました。
転写因子の発現で比較する方法はまったく私には考えつかず、
文献を検索したところ一定数のものが該当致しました。
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.4963-3 - 2016/04/04 (月) 09:07:15 - HIH
In vitroのレベルであれば一般論ではサイトカイン産生や転写因子発現が確認できれば分化誘導できたと言われるでしょう。%や発現強度など程度の差は問題にされないことが多いです。もちろん本質的には問題ですが。

ただ本質的な話をするなら何をもってTh1、Th2分化とするかというのは非常に難しい問題です。
少なくとも一つの細胞系譜として安定に存在すべきだと考える立場を取るなら、最低でもCpGサイトのメチル化やヒストン修飾などがそれぞれの系譜で特徴的なパターンを示すことが必要となってくるでしょう。実際それらにTh1,Th2特異的なものが存在することは言われています。

なので質問者様の研究の中でどの程度の厳密さでTh1、Th2の定義が必要なのかによって、解析方法は変わってくるかと思います。

(無題) 削除/引用
No.4963-2 - 2016/04/03 (日) 12:45:43 - おお
同じような解析を行っている論文は見つかりませんか?

Th1/Th2細胞への分化の評価 削除/引用
No.4963-1 - 2016/04/03 (日) 11:27:55 - 教えて偉いヒト
ナイーブCD4細胞(CD45RA+CCR7+)をin vivo、in vitroのそれぞれである刺激を与えて、Th1/Th2への分化誘導を評価したいと考えています。
細胞内染色によるFACSとELISA(IFN-gamma、Il-4など)しか解析方法は思いつかないのですが、そもそも何をもって「T細胞がTh1(Th2)方向に誘導された」と言えるのでしょうか。例えばコントロールとの比較をするにしても、どの程度サイトカインの分泌が確認できれば良いのか判断しかねています。
免疫分野での研究はまったくの無知で、的外れな質問でしたら申し訳ありません。
宜しくお願い致します。

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