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Cre特異的な逆行性トレーサー発現 トピック削除
No.4971-TOPIC - 2016/04/05 (火) 20:56:37 - カットマン
いつもお世話になっております。

現在「マウスにおいて、Creを発現させた任意の神経に逆行性トレーサーを発現することができるか」を文献調査しているのですが、調べて出てくる論文はウィルスを使っているものでハードルが高いと考えています。より簡便に逆行性トレーサーを発現させることはできないでしょうか。参考になる文献や、すでに販売されているTGマウスなどご存知の方がいらっしゃいましたらぜひご教授願いたいです。

特に「逆行性トレーサーを発現させる」ことを可能にしたいです。皆様の知識をお借りできたらと思います。よろしくお願いします。
 
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No.4971-5 - 2016/04/10 (日) 19:00:37 - カットマン
AAさん

ありがとうございます。
なかなか大変そうな実験ではありそうですが、うまくいけばあたりそうな感じですね。
担当教授にさらに調べてプレゼンしてみます。

お二方様、貴重なご意見ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.4971-4 - 2016/04/06 (水) 12:09:34 - AA
最近の傾向としては狂犬病ウィルスを利用したものが流行っている気がします。
理由として、WGAを含めて単独で逆行性輸送をされうる分子は
時間経過によってシナプスを複数またいで移動してしまうためです。

狂犬病ウィルスの実験の場合は、糖蛋白の発現を制限することによって
Cre存在細胞に感染した場合のみ逆行性輸送が可能なように設計されているため
こういった問題を避けられるという利点があります。

もともとの狂犬病ウィルス自体はグループ3に含まれる強力なウィルスですが、
改変されたものはP2で使用可能なようです。
ただし、大臣申請が必要な実験としてみなされるケースも有りますので
ご所属の機関の審査委員会に相談されることをおすすめします。

私自身は施設の都合上使ったことがないですが、使っている人たちのデータを見ると
他の発現逆行性トレーサーと比較すると一線を画すように思います。

(無題) 削除/引用
No.4971-3 - 2016/04/06 (水) 11:04:03 - カットマン
APさん
ありがとうございます。
発現させやすいものとしてWGAはチェックしていたのですが、順行性にも輸送されてしまうようなので候補から除いていました。


さらに調べてみたのですが、やはり狂犬病ウィルス、ブタヘルペスウィルスなどのウィルスを使うのが目的にあっていました。使ったことが無いうえ、周りに使っている方がいないのでハードルが高いと感じているのですが、それほど気負う必要は無いのでしょうか。使ったことのある方がいらっしゃいましたらぜひご意見を伺いたいです。

(無題) 削除/引用
No.4971-2 - 2016/04/05 (火) 21:56:05 - AP
文献上の知識でしかないですが、wheat germ agglutinin (WGA)を利用する方法は結構有名ではないでしょうか。もう検討済みかな。
http://www.pnas.org/content/99/23/15148.full
http://bmcneurosci.biomedcentral.com/articles/10.1186/1471-2202-9-96

Cre特異的な逆行性トレーサー発現 削除/引用
No.4971-1 - 2016/04/05 (火) 20:56:37 - カットマン
いつもお世話になっております。

現在「マウスにおいて、Creを発現させた任意の神経に逆行性トレーサーを発現することができるか」を文献調査しているのですが、調べて出てくる論文はウィルスを使っているものでハードルが高いと考えています。より簡便に逆行性トレーサーを発現させることはできないでしょうか。参考になる文献や、すでに販売されているTGマウスなどご存知の方がいらっしゃいましたらぜひご教授願いたいです。

特に「逆行性トレーサーを発現させる」ことを可能にしたいです。皆様の知識をお借りできたらと思います。よろしくお願いします。

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