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薬剤耐性株の評価 トピック削除
No.5163-TOPIC - 2016/06/16 (木) 10:36:43 - 院生
薬剤耐性株の機能評価について質問です。
現在薬剤耐性株を作成し、現在もある一定の薬剤濃度で培養を続けています。
薬剤はAKT阻害剤です。

この耐性株についてPI3K-akt経路をWBで評価、invasion assayやin vivoでの耐性能の確認を考えています。現在薬剤を添加した状態で培養を続けていますが、いったん薬剤をwash outしてから実験する必要があると思うのですが、どの程度の時間薬剤freeで培養する必要があるのでしょうか?

ある論文では実験に際して細胞をプレートに撒くときからのみ薬剤をwash outしているという論文もありました。ご助言頂けないでしょうか。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.5163-3 - 2016/06/16 (木) 20:22:38 - 院生
おっしゃる通りで評価したいこと、目的によりますよね。
薬剤を抜いた状態でタイムコースを追って、どのように変化するのか確認して決めよう思います。

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.5163-2 - 2016/06/16 (木) 12:22:52 - おお
>[Re:1] 院生さんは書きました :

> この耐性株についてPI3K-akt経路をWBで評価、invasion assayやin vivoでの耐性能の確認を考えています。現在薬剤を添加した状態で培養を続けていますが、

目的、見たいことによるんじゃないですか?
見たい事を反映しそうな生化学的パラメーター(WBとか)をタイムコースをおったりして、確認してからでもいいかもよ。というかそういう風にしていって詰めていくのが実験じゃないかなぁとおもう。また、パラメーターが薬剤有り無しで変わらないなら抜く時間を悩んでても仕方ないだろうし、、、

薬剤耐性株の評価 削除/引用
No.5163-1 - 2016/06/16 (木) 10:36:43 - 院生
薬剤耐性株の機能評価について質問です。
現在薬剤耐性株を作成し、現在もある一定の薬剤濃度で培養を続けています。
薬剤はAKT阻害剤です。

この耐性株についてPI3K-akt経路をWBで評価、invasion assayやin vivoでの耐性能の確認を考えています。現在薬剤を添加した状態で培養を続けていますが、いったん薬剤をwash outしてから実験する必要があると思うのですが、どの程度の時間薬剤freeで培養する必要があるのでしょうか?

ある論文では実験に際して細胞をプレートに撒くときからのみ薬剤をwash outしているという論文もありました。ご助言頂けないでしょうか。

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