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chip-qPCRの計算について詳しく教えてください 削除/引用 No.5179-1 - 2016/06/23 (木) 21:39:48 - chip初心者です chip-qpcrを行うために、薬物あり無しのサンプルに対してIgGと転写因子Xの抗体を使ってChIPを行いました。 あるプロモーター領域のプライマーとポジコンプライマーを使ってqPCRを行いたいのですが具体的にどのように計算すれば良いのか、またどのようにPCRをかければ良いのかわからないので教えてください。 Inputを使ってstandard curveを引く際、x10, x50, x250, x1250と希釈したInputを準備すれば良いと考えたのですが、この際のInputは薬物なしと薬物ありのものどちらを使うべきなのでしょうか？ 薬物ありなしのサンプルをそれぞれ比較するのであれば、Inputも薬物ありなしを等量混ぜたものをstandardに使用すべきなのでしょうか？ あとIgGと転写因子Xの抗体でchipしたDNAは希釈しても問題ないのでしょうか？ 例えばx5の 薬物未処置 IgG 薬物未処置 転写因子X 薬物処置 IgG 薬物処置 転写因子X と、inputをx10, x50, x250, x1250を使ってPCRをかけた場合、standard curveから得られたCt値を使ってどのように計算すれば%inputを算出できるのでしょうか？

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