Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

HPLCの前処理方法 トピック削除
No.52-TOPIC - 2012/01/18 (水) 19:12:58 -
アサリ、ウニ、シジミ、マグロ中のプトレッシンをHPLCで測定したいので抽出方法を教えて下さい。

上記のサンプルを30℃, 5日間で腐らせ、乳鉢で破砕したあと20mM PBSと0.1M HClで懸濁し、10000rpm, 15分間遠心し, 上清を得ました。得た上清を用いてプトレッシンオキシダーゼを反応させたのですが, 前任者と同じ系でサンプルの量が多かったのにも関わらず酵素反応させたときの吸光度が大分低い結果になりました。(酵素の精製度や活性に多少違いがありますが、そこを考えても大分低い)

このことから, ヒスタミンなどが阻害していることを考え, ヒスタミン抽出?するか、上清自体を濃縮することを考えました。

そこで教えて頂きたいのは魚介類のHPLCの前処理の仕方と、抽出物の濃縮方法です。どうぞよろしくお願いします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



2件 ( 1 〜 2 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.52-2 - 2012/01/19 (木) 11:30:42 - ~
腐らせている工程で、プトレシンの量に差が出るのでは?
5日間の発酵で同じ量のプトレシンが出来ることはどのようにバリデートされているのでしょうか?

阻害物質の混入を疑っているのでしたら、まずは今のサンプルで添加回収実験を行い、阻害が起きているかを確認されてはいかがでしょうか。

HPLCの前処理方法 削除/引用
No.52-1 - 2012/01/18 (水) 19:12:58 -
アサリ、ウニ、シジミ、マグロ中のプトレッシンをHPLCで測定したいので抽出方法を教えて下さい。

上記のサンプルを30℃, 5日間で腐らせ、乳鉢で破砕したあと20mM PBSと0.1M HClで懸濁し、10000rpm, 15分間遠心し, 上清を得ました。得た上清を用いてプトレッシンオキシダーゼを反応させたのですが, 前任者と同じ系でサンプルの量が多かったのにも関わらず酵素反応させたときの吸光度が大分低い結果になりました。(酵素の精製度や活性に多少違いがありますが、そこを考えても大分低い)

このことから, ヒスタミンなどが阻害していることを考え, ヒスタミン抽出?するか、上清自体を濃縮することを考えました。

そこで教えて頂きたいのは魚介類のHPLCの前処理の仕方と、抽出物の濃縮方法です。どうぞよろしくお願いします。

2件 ( 1 〜 2 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。