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RAW細胞へのLPS刺激時間、死ぬ? トピック削除
No.5349-TOPIC - 2016/08/23 (火) 11:53:57 - LPS
RAW264.7細胞へのLPS刺激時間について伺いたいと思います。
最近、RAWにLPS 100ng/mL処置する実験を始めたのですが、
overnight以上の刺激時間だと死んでしまいます。
過去の報告を見ると、48時間とか普通に処置しているように思います。
(なかにはsurviving cellを解析のように書いてあるものもあるのですが)
そのため、今私が培養している細胞に若干の不安を覚えています。

RAWにLPSを処置した経験をお持ちの方、
死んだりしたのかなどをお聞かせいただけませんでしょうか。

よろしくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.5349-3 - 2016/08/23 (火) 15:15:45 - LPS
ok様

ありがとうございます。
使用したLPSは、L4391 SIGMA
リポポリサッカリド from Escherichia coli 0111:B4 です。

後だしじゃんけんみたいですが、
1/10でも死にました。
1/100ではそこそこ生きているものもあるのですが、
おそらく薄過ぎて、細胞の見た目の変化の割合が明らかに悪く、
効いていなさそうに見えます。

(無題) 削除/引用
No.5349-2 - 2016/08/23 (火) 12:15:29 - ok
10分の1の濃度でもいいかもしれませんね。
100 ng/mlはやや高いと思います。

ところでLPSの種類はなんですか?
rough LPSですか?smooth LPSですか?

O側鎖が異なりますので、一概に100 ng/mlといっても分子量は一桁違うこともありますので、きちんと伝えた方がいいかもしれませんね。 LPS O111とかだとrough LPSになりますし、Re595だとsmooth LPSになります。

RAW細胞へのLPS刺激時間、死ぬ? 削除/引用
No.5349-1 - 2016/08/23 (火) 11:53:57 - LPS
RAW264.7細胞へのLPS刺激時間について伺いたいと思います。
最近、RAWにLPS 100ng/mL処置する実験を始めたのですが、
overnight以上の刺激時間だと死んでしまいます。
過去の報告を見ると、48時間とか普通に処置しているように思います。
(なかにはsurviving cellを解析のように書いてあるものもあるのですが)
そのため、今私が培養している細胞に若干の不安を覚えています。

RAWにLPSを処置した経験をお持ちの方、
死んだりしたのかなどをお聞かせいただけませんでしょうか。

よろしくお願い申し上げます。

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