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(無題) 削除/引用 No.5411-5 - 2016/09/21 (水) 10:27:18 - じじ 細胞密度の影響とのこと、納得です。 実際の画像もそのようになっています。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.5411-4 - 2016/09/21 (水) 09:47:39 - K 私はP19CL6という細胞を心筋細胞に分化させる実験を行っていました。 免染ではなく、自立拍動で分化の結果が分かるのでそこまで厳密な検証はしておりませんが、やはり細胞密度による影響はありました。 この細胞では、分化誘導の際に3.7x10^5cells/dish (6cm dish)という細かい設定が先人たちにより導かれており、Paracrine効果や接着因子の具合で分化効率が変わるものと理解していました。 実際に自分で細胞数をふって検証してみたところ、そこまで顕著な差はありませんでしたが、やはり効率的な細胞密度というのはありました。 特に小さいWellやNuncなどでは中央部と辺縁部では細胞密度が大きくことなるので、分化効率に差が出ることはむしろ自然なのではと思います。 私だったら、免染とのことですから、観察しやすいエリアに観察に適した細胞が現れる捲き方を探してみると思います。

(無題) 削除/引用 No.5411-3 - 2016/09/18 (日) 10:46:47 - サンショウウオ 表面張力で液が外周に寄ったなら液を増やせばよさそう。 細胞密度が中心と外周で違っていたなら、局所的な細胞密度の違いで分化率が変わったとかじゃないかなと。

(無題) 削除/引用 No.5411-2 - 2016/09/18 (日) 10:34:44 - じじ 補足いたします。 プレートの外周ではなく、1つのウェルの中で外周付近が良く分化しているように見えるということです。 しかし、マーカーによってはウェルの中央でも周囲でもよく染まるものもあるので、ウェル内の部位に依存した分化のしやすさといったものがあるのではないかと思っています。 同様の経験がある方などいましたらご意見いただければと思います。

マルチウェルでの細胞分化ムラ 削除/引用 No.5411-1 - 2016/09/18 (日) 10:00:43 - じじ マルチウェルプレートで筋芽細胞や神経幹細胞を分化させ、分化マーカーで免疫染色して細胞分化を確認しています。 両細胞とも、なぜかウェルの外周に近いところが分化マーカーでよく染まり、中央は余り染まりません。 これは免疫染色のアーティファクトでしょうか？ あるいはマルチウェルでは周囲の方が分化しやすいといったことがあるのでしょうか？

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