Bio Technical フォーラム

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FBSのロット間の細胞への影響の違い トピック削除
No.5417-TOPIC - 2016/09/20 (火) 17:39:11 - mou
お世話になります。

現在小さな研究チームで仕事をしており、聞ける相手が周囲にいないので基礎的なことかもしれませんが質問させてください。

FBSのロットチェックをする際、
ロットによって増殖速度が異なるというような経験はあるのですが、
最近行ったロットチェックで、あるロットは増殖が悪いどころが細胞がはがれてきてしまっていて毒性があるかのように見えました。

FBSに毒性があるなんてことはあるのでしょうか。
複数ロット(少数派ですが)に見られたので私の操作(非働化など)に問題でもあったのかと心配です。
操作は、56℃30分非働化(ボトル内の温度で管理)→分注→-80℃保存です。-30℃フリーザーが使用できなかったため急遽-80℃で保存しました。


問題のロットでは、細胞は播種したときよりも増えてはいるようなのですが一部丸くなってしまっており浮いている細胞が良いロットよりもかなり多い感じです。

増殖の良いロットを使用すればよいのですが、私の操作に問題があったならばロットチェックの結果が正しくないということになってしまうのかと思い、質問しました。

経験談など聞きたいと思います。よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.5417-3 - 2016/09/21 (水) 13:59:36 - おお
細胞何かなというのが気になりますけど、よく飼いならされたポピュラーなCell linesは非働化の必要もないですし、ロットで大きな差が出ることは少ないです。ただだめなロットが全くない保証はないです。

複数のロットで並行してやっていていいのがあるのなら、原因はともかくいいやつを使えばいいのでは。

(無題) 削除/引用
No.5417-2 - 2016/09/21 (水) 12:05:20 - 独り言
HeLaとか293なと一般的な細胞がメインですが、これまでロットチェックして増殖が著しく悪いというFBSにあたったことはないです。

-80度に入れてFBSが悪くなるなんてことはありえないので、ロット差なのではないでしょうか。

FBSのロット間の細胞への影響の違い 削除/引用
No.5417-1 - 2016/09/20 (火) 17:39:11 - mou
お世話になります。

現在小さな研究チームで仕事をしており、聞ける相手が周囲にいないので基礎的なことかもしれませんが質問させてください。

FBSのロットチェックをする際、
ロットによって増殖速度が異なるというような経験はあるのですが、
最近行ったロットチェックで、あるロットは増殖が悪いどころが細胞がはがれてきてしまっていて毒性があるかのように見えました。

FBSに毒性があるなんてことはあるのでしょうか。
複数ロット(少数派ですが)に見られたので私の操作(非働化など)に問題でもあったのかと心配です。
操作は、56℃30分非働化(ボトル内の温度で管理)→分注→-80℃保存です。-30℃フリーザーが使用できなかったため急遽-80℃で保存しました。


問題のロットでは、細胞は播種したときよりも増えてはいるようなのですが一部丸くなってしまっており浮いている細胞が良いロットよりもかなり多い感じです。

増殖の良いロットを使用すればよいのですが、私の操作に問題があったならばロットチェックの結果が正しくないということになってしまうのかと思い、質問しました。

経験談など聞きたいと思います。よろしくお願い致します。

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