Bio Technical フォーラム

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骨格筋新鮮凍結切片 トピック削除
No.5517-TOPIC - 2016/11/02 (水) 13:18:31 - MP
表題の通り、ラットの下肢骨格筋の新鮮凍結切片をHE染色したいと考えています。
液体窒素に漬けたビーカー内にイソペンタンを入れて、その中へ骨格筋をコルク片上にトララガントガムで接着したものを入れ掻き混ぜるようにして急速冷凍、標本を作製しました。

クライオスタット内で切片を作成し、筆でスライドガラス状に乗せ指で温めて接着してHE染色しているのですが、筋の辺縁がボロボロになってしまったりシワになったりして上手く作成できません。

良い方法をご存知の先生がいらっしゃいましたら是非ご助言下さいませ。
 
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骨格筋新鮮凍結切片 削除/引用
No.5517-3 - 2016/11/02 (水) 15:31:36 - MP
ありがとうございます。
新鮮ですと組織が柔らかすぎるためか、切るのに難渋します。
周りでも新鮮でやっている先生がいないので困っていました。

川本法も視野に入れます。

JoVEで 削除/引用
No.5517-2 - 2016/11/02 (水) 14:59:29 - ema
2015のJoVEで
http://www.jove.com/video/52793/?language=Japanese

http://www2.ngu.ac.jp/uri/ikensu/pdf/ikensu_vol0101_03.pdf
もありました。

筋はやっていないのですが、”足”をやっています。
本当に困ったときは、川本法のフィルムをつかってます。

骨格筋新鮮凍結切片 削除/引用
No.5517-1 - 2016/11/02 (水) 13:18:31 - MP
表題の通り、ラットの下肢骨格筋の新鮮凍結切片をHE染色したいと考えています。
液体窒素に漬けたビーカー内にイソペンタンを入れて、その中へ骨格筋をコルク片上にトララガントガムで接着したものを入れ掻き混ぜるようにして急速冷凍、標本を作製しました。

クライオスタット内で切片を作成し、筆でスライドガラス状に乗せ指で温めて接着してHE染色しているのですが、筋の辺縁がボロボロになってしまったりシワになったりして上手く作成できません。

良い方法をご存知の先生がいらっしゃいましたら是非ご助言下さいませ。

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