Bio Technical フォーラム

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シスチンを溶かしたい トピック削除
No.5532-TOPIC - 2016/11/08 (火) 17:20:47 - BBB
細胞培養についてです。実験で細胞培地にアミノ酸を添加するのですが
シスチンを培地に添加したいと考えています。
シスチンがDMSOやPBSなどにとけにくく困っています。
細胞に影響が少なくシスチンを溶かすことのできる溶媒を教えてもらいたいです笑

細胞はRAW細胞を用いています。
 
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(無題) 削除/引用
No.5532-6 - 2016/11/14 (月) 16:07:52 - BBB
遅くなりすみません。参考になりました!
ありがとうございます!

(無題) 削除/引用
No.5532-5 - 2016/11/10 (木) 18:15:58 - ema
当時のノートが出てきたので

50mM stock in 0.3N HCl 使用時(私のは)0.2mM
*溶けにくいのでVortexでもスターラーO/Nでもいい
フィルター(0.2μ)で凍結(しなくても良い)

stockを最終濃度(数µl)を培地に加えるのでなく、一度希釈するときは水で希釈すると析出するのでHClで微調整して溶かす

持ち込み 削除/引用
No.5532-4 - 2016/11/09 (水) 23:03:39 - ema
酸性が良くないので、持ち込みを少ない量で影響を少なくするために濃いストックを作っていました。
とはいえ、1000Xまでは溶けなかったので100Xくらいだったと思います。

(無題) 削除/引用
No.5532-3 - 2016/11/09 (水) 11:16:04 - BBB
お返事ありがとうございます。

希塩酸に溶かしたあと濃いめのストックを分注凍結する理由はなんでしょうか。
あと
培地に添加する際は酸性は良くないと思うのですが
どのように行なっていましたか?

まだまだ知らないことだらけなのですみません。

希塩酸 削除/引用
No.5532-2 - 2016/11/08 (火) 18:09:52 - ema
アミノ酸分析をしていた時に希塩酸で溶解して、濃いめのストックにして分注凍結して、培地添加していました。
ここを見ても希塩酸で溶かしているようです。
http://www.biocon.co.jp/data/html/lcystine.html

シスチンを溶かしたい 削除/引用
No.5532-1 - 2016/11/08 (火) 17:20:47 - BBB
細胞培養についてです。実験で細胞培地にアミノ酸を添加するのですが
シスチンを培地に添加したいと考えています。
シスチンがDMSOやPBSなどにとけにくく困っています。
細胞に影響が少なくシスチンを溶かすことのできる溶媒を教えてもらいたいです笑

細胞はRAW細胞を用いています。

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