Bio Technical フォーラム

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THP-1細胞の培養 トピック削除
No.5850-TOPIC - 2017/03/20 (月) 09:08:14 - m.suzuki
新しい実験の立ち上げで、THP-1細胞を扱うことになりました。
知り合いの企業から分けて頂いた細胞を、RPMI1640+10%FBS+抗菌薬(バンコマイシン、アンホテリシンB、ゲンタマイシン)入りの培地を作成し、継代したところ、細胞同士がくっつき、大きな塊が沢山出来てしまいました。
譲って頂いた培地で継代していたときには、そのようなことはありませんでした。

どなたか原因はわかりますでしょうか?

思い当たる事と言えば、アンホテリシンの濃度を間違えて濃くしてしまった(0.5mg/L→2.5mg/L)のですが、それが影響することは考えられますか?
 
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(無題) 削除/引用
No.5850-2 - 2017/03/20 (月) 12:21:16 - tracker
5倍である点以外は同じ培地を使用されているんですよね?

THP-1は使ったことないですが、
Lipids in Health and Disease201110:144
によれば、500ng/mlのファンギゾンで多少細胞毒性が出ているようですね。
その5倍とのことですので割とダメージがあるのではないですか?

THP-1細胞の培養 削除/引用
No.5850-1 - 2017/03/20 (月) 09:08:14 - m.suzuki
新しい実験の立ち上げで、THP-1細胞を扱うことになりました。
知り合いの企業から分けて頂いた細胞を、RPMI1640+10%FBS+抗菌薬(バンコマイシン、アンホテリシンB、ゲンタマイシン)入りの培地を作成し、継代したところ、細胞同士がくっつき、大きな塊が沢山出来てしまいました。
譲って頂いた培地で継代していたときには、そのようなことはありませんでした。

どなたか原因はわかりますでしょうか?

思い当たる事と言えば、アンホテリシンの濃度を間違えて濃くしてしまった(0.5mg/L→2.5mg/L)のですが、それが影響することは考えられますか?

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