Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

培地の汚染 トピック削除
No.5860-TOPIC - 2017/03/28 (火) 00:40:34 - かけだし大学院生
初めて培養で、細菌汚染を経験しました。

偏光顕微鏡で細胞の間に蠢く黒い小さいつぶつぶが大量におりました。6wellの1wellのみだったので、落下菌が原因だと思うのですが。

汚染が起こると培地の色(フェノール成分)が赤から黄色に変わると思っていたので、みつけた時にはびっくりしました。細胞もまだ生きて(接着して)おりましたし。

汚染が起きても培地の色が変わらないこと、結構あるものでしょうか???
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


解決済み 解決済み 削除/引用
No.5860-6 - 2017/03/30 (木) 10:02:23 - かけだし大学院生
解決済みにしました。

(無題) 削除/引用
No.5860-5 - 2017/03/30 (木) 09:56:13 - かけだし大学院生
>ものくろ
死細胞ではないと思います。。。(証明はできませんが、安定して継代していたので)
しかしそのように見えることもあるということですね。。。

>おお
確かにそう言われればそうですね。緩衝作用がありますね。。。

1、皆様>
色々と貴重な意見を頂き有難う御座います。今後の参考にさせて頂きます。

(無題) 削除/引用
No.5860-4 - 2017/03/28 (火) 12:17:21 - 1
培地の色が黄色くなるのはコンタミがかなりひどくなった時です(培地自体が目視で白濁したりとかするくらい)。抗生剤入培地や菌の増殖が遅いものでは変化ないことは多いです。また微生物の種類によっては(特にアルギニンを分解する酵素を産生するようなものなどでは)pHが上がりむしろ赤くなります。フェノールレッド濃度が低い培地では変色してもよくわからない事もあります。なので色調変化はコンタミの検出ではあまりあてになりません。菌自体が細胞を傷害するような毒素を産生しないものならば、あるいは毒素が血清で中和されて影響が抑制されているなどされていれば、明らかなコンタミがおきてても細胞に目立った変化はみられないことはあります。

死んだ細胞からちぎれた残骸が強拡大でみるとブラウン運動で動いて見えることはよくあります。大きさや形が不整で、ある限られた領域内で運動しているものはその可能性があります。怪しい培地だけを一部とって違うwellあるいはdishに移して細胞なしで培養してみて、それで増殖してくるかどうかみるとわかります。ただ偏光顕微鏡で細胞を見た事無いので、どのように見えるか分かりません。

(無題) 削除/引用
No.5860-3 - 2017/03/28 (火) 03:03:38 - ものくろ
死細胞の可能性もあるかもですね。細胞が死んで、その細胞内小器官がでてきてしまって、そのブラウン運動を見ているかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.5860-2 - 2017/03/28 (火) 00:56:30 - おお
あります。培地自身緩衝効果がありますし。

培地の汚染 削除/引用
No.5860-1 - 2017/03/28 (火) 00:40:34 - かけだし大学院生
初めて培養で、細菌汚染を経験しました。

偏光顕微鏡で細胞の間に蠢く黒い小さいつぶつぶが大量におりました。6wellの1wellのみだったので、落下菌が原因だと思うのですが。

汚染が起こると培地の色(フェノール成分)が赤から黄色に変わると思っていたので、みつけた時にはびっくりしました。細胞もまだ生きて(接着して)おりましたし。

汚染が起きても培地の色が変わらないこと、結構あるものでしょうか???

6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。