Bio Technical フォーラム

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stable cell lineを作る方法 トピック削除
No.5891-TOPIC - 2017/04/07 (金) 18:12:29 - 只野仁
某癌細胞のstable cell lineを作るために
二つの方法を検討しています。

一つはLipofectaminを使う方法
もう一つはCRISPR-Cas9を使う方法

です。ノックアウトを安定化させたcell lineを自分が使う細胞で作った報告例がなく、特に、後者では使用感が全く分からないため、transfectionに比べて、CRISPR-Cas9の使用感やstable cell line作製効率はどちらの方が優れているのかなど、ご意見を頂ければ幸いです。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.5891-3 - 2017/05/20 (土) 15:37:40 - 名無し
解決しました。ご教示どうもありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.5891-2 - 2017/04/07 (金) 21:57:16 - おお
と言いますが、、、両者で作成する細胞株は異なるわけですよね、、、
前者はプラスミドを導入して薬剤でセレクションするわけで、、、Transfectionの効率がそんなに高くなくてもなんとか入った細胞は得られる可能性はあると思います。

後者はTransfectionの効率次第だと思いますが、導入の仕方はいく通りかあるのでは。。。

stable cell lineを作る方法 削除/引用
No.5891-1 - 2017/04/07 (金) 18:12:29 - 只野仁
某癌細胞のstable cell lineを作るために
二つの方法を検討しています。

一つはLipofectaminを使う方法
もう一つはCRISPR-Cas9を使う方法

です。ノックアウトを安定化させたcell lineを自分が使う細胞で作った報告例がなく、特に、後者では使用感が全く分からないため、transfectionに比べて、CRISPR-Cas9の使用感やstable cell line作製効率はどちらの方が優れているのかなど、ご意見を頂ければ幸いです。

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