Bio Technical フォーラム

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HDFの播種数に関して トピック削除
No.6097-TOPIC - 2017/07/03 (月) 15:34:33 - KANA

今度追加実験でHDFを用いることになりましたが、
増殖速度などが不明です。
もし取り扱ってらっしゃる方がおられましたら、

・3〜4日でコンフルになる播種数
・取り扱う上での注意点

培地はDMEM(10%FBS,L-glu,ペニスト)、
1/10Trpを用いております。

などありましたらご教授頂けませんでしょうか。
宜しくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.6097-3 - 2017/07/04 (火) 00:49:17 - おお
正常細胞と推測しますがこういう細胞は由来のヒトの個人差もあるだろうから、扱ってみないとわからないかもしれませんけど、各社販売はしているようなのでそういうところからプロダクトマニュアルなど見てその条件で始めればいいのかと思います。入手先から何か情報があればそれが一番良いと思います。そもそも男性から取ったのかとか、女性から取ったのかとか採取したときの歳とか、何代継代されたのかとか、どれくらいの代数で増殖が止まるとか、情報がある程度必要あるいはあったほうがいいのではないでしょうか?

まあ線維芽細胞は老化し始めてなければ5〜10分の1まけば大体3、4日でほぼコンフルになります(Doubling timeは24時間前後でしょうから)。分裂回数による代数がある程度はっきりしていたほうがいいので、4か8分の1の継代がいいかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.6097-2 - 2017/07/03 (月) 17:44:26 - mon
ATCCとか
http://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocols/biology/human-dermal-fibroblasts.html
は参考になりませんか?

HDFの播種数に関して 削除/引用
No.6097-1 - 2017/07/03 (月) 15:34:33 - KANA

今度追加実験でHDFを用いることになりましたが、
増殖速度などが不明です。
もし取り扱ってらっしゃる方がおられましたら、

・3〜4日でコンフルになる播種数
・取り扱う上での注意点

培地はDMEM(10%FBS,L-glu,ペニスト)、
1/10Trpを用いております。

などありましたらご教授頂けませんでしょうか。
宜しくお願い致します。

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