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(無題) 削除/引用 No.6416-5 - 2017/10/25 (水) 17:06:43 - Tany >おおさん ご回答ありがとうございます． 抗生物質の有無はあまりストックの質に関係しないのですね． 自分のやり方に少し不安になっていましたので安心しました． ありがとうございました．

(無題) 削除/引用 No.6416-4 - 2017/10/25 (水) 16:02:53 - おお 保存は抗生物質があってもなくてもいいです。私は気にしません。培養していた培地にグリセロール加えることもあるだろうし。 プラスミドの脱落は保存中には起らないでしょうけど、戻したとき保存などのストレスで目的のプラスミドが増えないクローンなども出てくることが結構ある。ただ、これは保存のときの抗生物質の有無は関係ないと思う。

(無題) 削除/引用 No.6416-3 - 2017/10/25 (水) 15:56:05 - Tany >monさん 確かに，よく考えなくても-80℃で酵素反応は進みませんよね・・・． こちらの考えが足りていませんでした． プラスミドの脱落が分裂時に生じるとすると， 増殖しない＝プラスミドの脱落もないと考えてよいのでしょうか?

(無題) 削除/引用 No.6416-2 - 2017/10/25 (水) 15:43:34 - mon 凍結保存中には酵素反応は進まない（増殖もしない）から、抗生剤は効かないですよ。

大腸菌のグリセロールストックに抗生物質は必要か? 削除/引用 No.6416-1 - 2017/10/25 (水) 15:02:57 - Tany いつも参考にさせていただいております． 一つ素朴な質問なのですがよろしくお願いいたします． 大腸菌のグリセロールストックを作る際，グリセロールを含む培地には抗生物質などの選抜薬剤を加えないのが一般的なプロトコルだと思います． 私はプラスミドの脱落やコンタミが怖いので選抜薬剤を加えるようにしていますが，長期保存の際の抗生物質の影響が気になります． 例えば，低温保存中にプラスミド中の選抜マーカー遺伝子の発現が減少し，菌が死んでしまう等ということはありうるのでしょうか？ 皆様はグリセロールストック作成に際にどのようにされているのかお聞かせください． よろしくお願いいたします．

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