全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.660-8 - 2012/06/27 (水) 07:15:30 - CCC みなさん、ありがとうございます。 たくさんのご意見参考になります。 >>KY様 確かに比活性なので、メーカーでどれを100と取るかで変わってきますね。 こういった活性の取り方は、出来れば統一して貰いたいものです。 >>AP様 全く思いもよらない部分でした。さすがAPさんです。確かに使うLow Bind tubeの条件によっては変わってきそうですね。それにしても大きな差です。 >>cc様 promegaでも然程下がっていないようですね。toyoboではM bufferが至適 のようです。同じ酵素でもここまで違うかと思うと驚きです。ラボのみな さん、メーカー構わずTakaraのdouble digestion表を見ているようで、特 に大きな問題も発生していないので大丈夫だとは思うのですが。 本当に不思議です。

(無題) 削除/引用 No.660-7 - 2012/06/27 (水) 04:36:19 - cc おもしろいですね。 気になってみてみましたが、Promega, NEB(75%)でも高塩濃度においてそれほど活性が下がる事はないようですね。 塩濃度依存性に関わる、予期せぬ変異が入っている可能性はあるかもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.660-4 - 2012/06/26 (火) 20:41:28 - ami APさん いいね！

(無題) 削除/引用 No.660-3 - 2012/06/26 (火) 19:39:28 - AP mutationをいれているとかではなく、タンパク質としては同じもののはずです。 こんな想像をしてみるのですが、 XbaIは吸着による失活を起こしやすい。吸着の程度は使用するチューブによって違うのだから、その一点でもTAKARAとRocheで条件が違うだろう。 BSAの添加は吸着防止の効果がある。塩濃度を上げるのも吸着力を弱める。 至適塩濃度と吸着ロスとのバランスの取り方が、両社で違うのではないか。

(無題) 削除/引用 No.660-2 - 2012/06/26 (火) 16:20:44 - KY おそらく、 精製の違い、アッセイ系の違い、定量系の違い、もしかしたら実験した人の違い、国の気候の違い、インキュベーター安定性などがそういった違いを産んだのだと思います。 なので、基本的には酵素と同じ会社が推奨するバッファーを使用することがベターです。 そもそも100％を一番とした比活性なので、Ａ会社ではＨバッファーが100％でＭバッファーが５０％として、Ｂ会社ではＨとＭバッファー両方が100％だとしても、Ｂ会社の100％がＡ会社の100％と同じとはかぎりません。もしかしたらＡ会社のＭバッファーの50％とＢ会社のＭバッファーの100％が同じ活性だったのかもしれません。

制限酵素XbaIの違い 削除/引用 No.660-1 - 2012/06/26 (火) 00:26:50 - CCC お世話になっております。 普段はTAKARAのXbaIを使用しているのですが、急遽残っていたRocheの XbaIを使うことになりました。ここで使用Bufferを確認したのですが、 TAKARAではMedium bufferにfinal conc. 0.01％ でBSAを添加していましたが RocheではHigh buffer使用となっていました。TAKARAのXbaIでHigh bufferを 使用すると活性が20%になるとありますが、Rocheでは100%活性になっています。 同じ酵素でbufferの違いが発生する理由はなんなのでしょうか？ それぞれのメーカーでmutation入れた酵素でも作っているのでしょうか？

全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---