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ヒトタンパク発現マウス細胞のFACS 削除/引用 No.6604-1 - 2018/01/20 (土) 20:59:59 - CC ヒトCD抗原を発現させたマウスがん細胞を研究室で用いています。 PE-抗ヒトCD抗原 マウス抗体を用いてFACSをするのですが、 その際にいままで実験していた人が言うには、今までその人はヒト用のFcブロッキングを用いていたそうです。 CD抗原はマウスですがマウス細胞を用いており、Fc receptorがあるとしたらマウスのものであると考えられ、ブロッキングはマウス用のものではないかと思いました。同僚に聞いても、マウス用のブロッキング剤では？と言われ、どちらが正しいのか混乱しています。 確認のため、マウスブロッキング、ヒトブロッキングそれぞれを使ってマウスIsotypeコントロールも含めて実験したところ Unstained (mouse blocking) PE+ 0.02% Unstained (human blocking) PE+ 0.04% とかわりなし Isotype control (mouse blocking) PE+ 0.51% Isotype control (human blocking) PE+ 0.07% CD抗原染色 (mouse blocking) PE+ 85.40% CD抗原染色 (human blocking) PE+ 85.42% とかわりなし とIsotypeのみ違いがあり、さらに混乱しました。 結局、CD抗原染色だけみたら、Isotype control必要なし、human blocking でもmouse blockingでも変わりなし。と言えると思うのですが、 このIsotype controlの違いはどう解釈したら良いのでしょうか。 みなさまは、この場合、マウスFcブロッキング と ヒトFcブロッキングのどちらを使用されますか？ よろしくお願いいたします。

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