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(無題) 削除/引用 No.6690-10 - 2018/02/15 (木) 22:09:48 - matpat ＞おおさん 色々とアドバイスを有難うございました。プロモーターを探してみます。 ＞tfaさん 貴重なアドバイスを有難うございました。

(無題) 削除/引用 No.6690-9 - 2018/02/15 (木) 19:16:29 - tfa 他の方がおっしゃるように発現にはまず影響しないでしょう 抜いた後に別の耐性遺伝子を乗せるなどを考えている場合はあとで余計な手間が増えるかもしれません。上の人に一応確認しておきましょう。

(無題) 削除/引用 No.6690-8 - 2018/02/15 (木) 14:42:23 - おお Neoのすぐ上流にNeoを発現させるためのプロモーターがあるんだと思うのですが、確認してください。 CAG-GFP-bGHpA-bGHpAとなってもCAG-GFP-bGHpAこのユニットに影響が出ることはまずないでしょう。

(無題) 削除/引用 No.6690-7 - 2018/02/15 (木) 11:15:50 - matpat メッセージを有難うございます。 まだ自分で細胞に導入したこともないので、GFPの発現に関してはわかりません… ＞TK-1さん stufferとはいかなるものでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.6690-6 - 2018/02/15 (木) 10:07:51 - TK-1 Stuffer?

(無題) 削除/引用 No.6690-5 - 2018/02/15 (木) 09:26:21 - おお C-termタグようかな、、、そのまま使った場合GFP発現します？

(無題) 削除/引用 No.6690-4 - 2018/02/15 (木) 09:12:31 - おお >CAG-GFP(without methionine) ?

(無題) 削除/引用 No.6690-3 - 2018/02/15 (木) 07:04:18 - matpat 解答有難うございます。 もらったマップには CAG-GFP(without methionine)-bGHpA-Neo-bGHpA とあります。

(無題) 削除/引用 No.6690-2 - 2018/02/15 (木) 06:53:08 - おお 影響ないと思いますが。ただ理屈以外の予期せぬことが起こる可能性は否定できません（それは違う場合にも起きますけど）。ただちょっと具体的にどうなっているのかピントきません。 Promoter-GFP-pA-Promoter-Neo-bGHpAがもとのコンストラクトですか？

クローニングにおけるbGHpA配列について 削除/引用 No.6690-1 - 2018/02/15 (木) 06:24:38 - matpat クローニングを始めたばかりの者です。初歩的な質問で申し訳ありません。 GFPとNeo耐性遺伝子が組み込まれているプラスミドがあり、そこからNeo耐性遺伝子を取り除いたコンストラクトを作るように言われました。 プラスミドマップをみるとNeo耐性遺伝子の後ろのbGHpA配列があるのですが、Neo耐性遺伝子だけを取り除いて後ろのbGHpA配列が残った場合、前にあるGFPの発現に悪影響をもたらしうるのでしょうか？

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