Bio Technical フォーラム

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蛋白抽出の際の透析 トピック削除
No.678-TOPIC - 2012/06/29 (金) 15:34:45 - 病理学
現在、脳組織からある蛋白を抽出するためのプロトコールを調べていて、いくつかの論文を読んでいたるのですが、いずれも手技中に“〜dialysed(透析した)”といった表現が出てきて、この部分が理解できずに先に進めずにいます。

ある論文からの引用ですが、

{×××(ある蛋白名) was dialysed against 50mM Tris-HCl, pH 7.5, overnight at 4℃ and centrifuged at 100,000×g for 1h at 4℃ to remove precipitating material.}

とあり、これは透析チューブをの中に目的蛋白を含んだ上清(上記の前に目的蛋白を含有する上清を採っている)を入れ、漏れ出ないようにした上でトリス塩酸バッファーに浸けて透析するということでいいのでしょうか?

うちのラボにこの手の実験に詳しいものがいないのでご助言いただければ、助かります。よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.678-3 - 2012/06/29 (金) 18:21:08 - qq
タンパクを透析する人がいないのであれば、PierceのSlide-A-Lyzer Dialysis Cassettesを使うのが簡単かもしれません。

(無題) 削除/引用
No.678-2 - 2012/06/29 (金) 17:55:44 - ami
最後のは precipitated material.の方がいいでしょう。

蛋白抽出の際の透析 削除/引用
No.678-1 - 2012/06/29 (金) 15:34:45 - 病理学
現在、脳組織からある蛋白を抽出するためのプロトコールを調べていて、いくつかの論文を読んでいたるのですが、いずれも手技中に“〜dialysed(透析した)”といった表現が出てきて、この部分が理解できずに先に進めずにいます。

ある論文からの引用ですが、

{×××(ある蛋白名) was dialysed against 50mM Tris-HCl, pH 7.5, overnight at 4℃ and centrifuged at 100,000×g for 1h at 4℃ to remove precipitating material.}

とあり、これは透析チューブをの中に目的蛋白を含んだ上清(上記の前に目的蛋白を含有する上清を採っている)を入れ、漏れ出ないようにした上でトリス塩酸バッファーに浸けて透析するということでいいのでしょうか?

うちのラボにこの手の実験に詳しいものがいないのでご助言いただければ、助かります。よろしくお願いします。

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