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GFP蛍光を目視で観察するのに必要な発現量 トピック削除
No.6780-TOPIC - 2018/03/20 (火) 16:43:43 - xyz
タイトルの通りです。

マウスにおいて、GFP蛍光を目視で観察するのに必要な発現量はどの程度あればよいのでしょうか。
GFP遺伝子をある遺伝子にノックインしたとして、その本来の遺伝子がどの程度発現していれば、GFP蛍光を目視で見ることが可能か、何か情報がありましたら教えてください。
GFPが全身の細胞質に発現する場合を想定してください。

リアルタイムPCRでβactinのCtが15としたときの最低限をお示しくださると感覚的にわかりやすいです。
よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.6780-3 - 2018/03/20 (火) 23:01:46 - xyz
AAさん
言葉足らずで申し訳ありません。

ご説明された内容がまさに知りたかったことです。
やはり相当量のGFPタンパクが発現しないと、フィルターを通してやっと見えるレベルなのですね。
参考に致します。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.6780-2 - 2018/03/20 (火) 20:18:01 - AA
目視、というのは蛍光灯などの光量で肉眼で、ということでしょうか?

具体的な発現量は知りませんが、CAGなど強制発現系のプロモーター下で
発現するマウスは個体を肉眼で自然な光のもとでみても色がついて見えます。
一方でケラチンやコラーゲンなどのプロモーターで上皮細胞に発現させるマウスでは、
残念ながら蛍光観察用のハンディタイプの光源とフィルターが無いと
野生型のマウスと見分けが付きませんでした。

GFP蛍光を目視で観察するのに必要な発現量 削除/引用
No.6780-1 - 2018/03/20 (火) 16:43:43 - xyz
タイトルの通りです。

マウスにおいて、GFP蛍光を目視で観察するのに必要な発現量はどの程度あればよいのでしょうか。
GFP遺伝子をある遺伝子にノックインしたとして、その本来の遺伝子がどの程度発現していれば、GFP蛍光を目視で見ることが可能か、何か情報がありましたら教えてください。
GFPが全身の細胞質に発現する場合を想定してください。

リアルタイムPCRでβactinのCtが15としたときの最低限をお示しくださると感覚的にわかりやすいです。
よろしくお願いいたします。

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