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(無題) 削除/引用 No.6805-3 - 2018/04/02 (月) 15:43:45 - おお プラスミドは精製方法によっては毒性がいくらかある場合があります。 プラスミドの量が５倍で、それに伴ってLipofectamineの量も増やしたのであればLipofectamineの毒性も考慮に入れるべきかもしれません。またDNAだけを増やしたなら至適なLipofectamineに対する割合から外れてしまっていて導入効率が落ちているかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.6805-2 - 2018/04/02 (月) 05:38:28 - P 入れすぎると、細胞が死ぬことがあります。倍量程度は大丈夫のようです。細胞の数も大事です。

transfectionでのDNAの量について 削除/引用 No.6805-1 - 2018/04/02 (月) 01:39:18 - 学部四年生 transfectionの際にprotocolで規定或いは推奨されている量のおよそ5倍のplasmidを導入してしまいました。 transfectionから3日後にゲノムを改修する際plateを見たところ、細胞数が少なく感じられました。 plasmidを過剰量導入すると細胞死を引き起こしたり、或いは細胞増殖を抑制したりするのでしょうか？ 細胞はHEK293Tで、trasfection試薬はLipofectamine3000を使用しました。 初歩的な質問で申し訳ありませんが、何卒よろしくお願いいたします。

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