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安価なmyc抗体でおすすめはありますか?? トピック削除
No.6870-TOPIC - 2018/04/25 (水) 12:28:52 - サンタさん
サンタクルズ社からウサギ抗myc抗体を買っていました。
当方アメリカ在住でして、279ドルで200マイクログラムの容量で売られていましたが、ご存知のようにポリクロの取り扱いができなくなって以来、手持ちのものを大切に使用しています。

ついに底を尽きそうなため、代替品を探しています。
免疫沈降をよくしますので、その検出を9E10というマウスモノクロに固定していますので、マウス以外、ウサギやゴート、シープ、ラット等で探しています。

ただいくつかのメーカーを見てみますと、279ドルで200マイクログラムというサンタクルズ社の太っ腹が判明しました。免疫沈降に3-5マイクログラムほど使用していますので、安価で良いmyc抗体をご存知であれば情報をシェアしていただけますと幸いです。
 
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No.6870-15 - 2018/05/01 (火) 13:33:12 - AP
ハイブリドーマを入手して、培養上清をたくさんとって、抗体を回収濃縮する。
硫安沈殿くらいでできるんじゃないかな
http://dshb.biology.uiowa.edu/9E-10_2

(無題) 削除/引用
No.6870-13 - 2018/05/01 (火) 01:16:46 - てーせる
前にラボの先輩がNovusのGoat抗体を使っていました。
1mg/1mlで1200ドルくらいだったはずなので、
1μgの単価ではサンタと同じくらいです。
Publicationもありますが、いずれも免染の結果のようです。

https://www.novusbio.com/products/c-myc-antibody_nb600-338#PublicationSection

(無題) 削除/引用
No.6870-12 - 2018/04/28 (土) 04:30:07 - おお
ん、あっそうか9E10ではだめなのですね。。。あと腹水も各社動物愛護の観点から作りにくくなってるのかな。。。生産は規制の緩い国でまだ出来そうな感じはあるけど、探さないとわからないですね。

ラットモノクロは腹水では難しいらしいし、ラビットモノクロはAbcamのやつは確かリコンビナントで腹水では作れなかったと、、、

ならば精製していない血清で探すかな、、、あるいは大きな動物で血清をカスタムで作るとどの程度のコストでできるか相談してみるのもありかな。

(無題) 削除/引用
No.6870-11 - 2018/04/27 (金) 17:16:03 - んー
Covanceは今はBioLegendですね。私の紹介したpoly anti-c-Mycも元はCovanceブランドとあります。
でも、いまはBioLegendから腹水(とうことはmouse抗体の9E10ですかね)のanti-c-Mycはproduct listにないですね。

(無題) 削除/引用
No.6870-10 - 2018/04/27 (金) 13:00:57 - おお
経験的にはCovanceという会社(社名は変わったかどっかに吸収された)の腹水は10000倍ぐらいで十分でした。IPでも使ったけど1ulでIgGの量は十分でした。

(無題) 削除/引用
No.6870-9 - 2018/04/27 (金) 10:45:00 - サンタさん
おおさんありがとうございます。

> まあ高いけど精製して販売している抗体よりも感覚的には4ー5倍高い濃度はあるんじゃないかと。。。だから割安かなと思ってるのです。9E10ではだめなんですか?

サイトを見てみたらウエスタンにこの腹水を150倍希釈で用いると書かれていますね。
サンタクルズの抗体は0.2mg/mlですが、1000倍でもウエスタンで使えますので、そうなると腹水の方が随分割高な印象を受けますね。

免疫沈降させたいので、同種のものを避けたいです。
true blotや非還元SDS-PAGEでも試しましたが、うまくいきませんでしたので、種の異なる抗体を用意する必要がありますです。

(無題) 削除/引用
No.6870-8 - 2018/04/27 (金) 10:15:21 - おお
>[Re:7] サンタさんさんは書きました :

> にしても腹水高いですね。もうヌードマウスか何か買ってきて、ハイブリドーマ打ち込んで自前で作った方が一生困らぬ量の抗体を得られそうですね。

まあ高いけど精製して販売している抗体よりも感覚的には4ー5倍高い濃度はあるんじゃないかと。。。だから割安かなと思ってるのです。9E10ではだめなんですか?

(無題) 削除/引用
No.6870-7 - 2018/04/27 (金) 09:24:53 - サンタさん
んーさん、ありがとうございます!

なるほど、500マイクログラムですとサンタクルズよりは安いですね。ありがとうございます。

おおさん、

腹水のままでも売られているんですね。
ただ質問は、マウス以外の抗体で、とのことなので目的のものではないですね。
にしても腹水高いですね。もうヌードマウスか何か買ってきて、ハイブリドーマ打ち込んで自前で作った方が一生困らぬ量の抗体を得られそうですね。

(無題) 削除/引用
No.6870-6 - 2018/04/27 (金) 06:58:54 - おお
ttps://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/m5546?lang=en&region=US
腹水で売っているやつがあればそれを買えばいいかと、、、

(無題) 削除/引用
No.6870-5 - 2018/04/26 (木) 22:14:57 - んー
えっと、値段でみると
BioLegend #906302 rabbit polyが500 ug $589。ただし、200 ugは$381。
ApplicationにWB/IF/IPとありますが、私はIPの使い勝手は知りません。

(無題) 削除/引用
No.6870-4 - 2018/04/26 (木) 19:52:01 - サンタさん
ハイブリドーマバンクから細胞を購入したとして、最近は腹水を作られることを動物愛護の観点から難しくなったと聞きます。となると高いタイターの抗体は細胞を購入しても得られないのでしょうかね?

(無題) 削除/引用
No.6870-3 - 2018/04/26 (木) 08:04:43 - サンタさん
おおさんありがとうございます。

なるほど。
ただマウスのモノクロかラットかになりますかね。。ラビットでもモノクロがあるかな?
ハイブリドーマバンクで調べてみます。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.6870-2 - 2018/04/26 (木) 04:25:52 - おお
たとえばAscitesで精製していないようなものであれば、抗体としての濃度も結構高くそういうのを考慮すると割安だろうと思ってます。

安価なmyc抗体でおすすめはありますか?? 削除/引用
No.6870-1 - 2018/04/25 (水) 12:28:52 - サンタさん
サンタクルズ社からウサギ抗myc抗体を買っていました。
当方アメリカ在住でして、279ドルで200マイクログラムの容量で売られていましたが、ご存知のようにポリクロの取り扱いができなくなって以来、手持ちのものを大切に使用しています。

ついに底を尽きそうなため、代替品を探しています。
免疫沈降をよくしますので、その検出を9E10というマウスモノクロに固定していますので、マウス以外、ウサギやゴート、シープ、ラット等で探しています。

ただいくつかのメーカーを見てみますと、279ドルで200マイクログラムというサンタクルズ社の太っ腹が判明しました。免疫沈降に3-5マイクログラムほど使用していますので、安価で良いmyc抗体をご存知であれば情報をシェアしていただけますと幸いです。

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