ギブソンアッセンブリでベクターにインサートを乗せ換えようとしています。
この手法に取り組むのが初めてなので疑問がいっぱいです。
他方に相補的な配列を余分につけてDNAをつなぎ合わせるという認識(雑ですいません><)なのですが、この余分な配列をつけるのはインサート側とベクター側どちらでもいいのでしょうか?
私の研究室ではインサート側にオーバーラップ配列をつけることになっており、また企業の製品紹介ぺージの図などでもインサート側につけているように見えます。
しかし原理的にはどちらでもいいのでは?と思って質問いたしました。
それともつなぎ合わせる配列の長さによってどちらにつけるかを変えたりするのでしょうか?実践している皆様、回答お待ちしております。
ちなみにインサートが約2000bp、ベクターが約5000bpです。 |
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